ГРИНБЛАТТА-ХАРТМЕНА МЕТОД

Категория :

Описание

ГРИНБЛАТТА-ХАРТМЕНА МЕТОД (I. Greenblatt, S. Hartman) — количественное определение содержания кальция в биологических жидкостях; представляет собой один из вариантов комплексонометрических методов определения кальция, основанных на разработанном Шварценбахом (G. Schwarzenbach) принципе комплексонометрического титрования (см. Комплексонометрия).

Содержание кальция в биол, жидкостях изменяется при гиперпаратиреозе, миеломе, сердечной недостаточности, рахите, остеомаляции и других заболеваниях.

Метод основан на свойстве комплексообразующих органических соединений — комплексонов, например ЭДТА, образовывать с кальцием недиссоциирующее растворимое бесцветное соединение — комплексонат или так наз. внутрикомплексное соединение (хелат). Комплексонометрический индикатор мурексид (пурпурат аммония) также образует с кальцием внутрикомплексное соединение оранжево-розового цвета, к-рое является более лабильным, чем соединения ионов Ca2+ с ЭДТА. Поэтому при добавлении ЭДТА к комплексу мурексид-кальций ионы Ca2+ начинают связываться с ЭДТА, и в точке эквивалентности появляется сине-фиолетовое окрашивание, определяемое окраской мурексида, который в щелочной среде в свободном состоянии имеет сине-фиолетовый цвет. Количество израсходованного комплексона прямо пропорционально концентрации ионов Ca2+.

Ход определения

К 0,5—2 мл биол, жидкости (кровь, суточная моча, цереброспинальная жидкость) прибавляют 8 мл воды. Быстро перемешивают, добавляют 2 мл 1 н. р-ра NaOH, примерно 0.2 г индикатора (0,2 г мурексида смешивают со 100 г кристаллического Nadi) и смесь титруют ЭДТА (4 г двунатриевой соли ЭДТА в 800 мл дист, воды + 0,86 г NaOH, доводят до 1 л дист, водой) до появления стабильного сине-фиолетового окрашивания. Аналогичным образом обрабатывают стандартный р-р, 1 мл к-рого содержит 0,1 мг Ca.

Нормальные величины содержания кальция в крови составляют у взрослых 8,5--12 мг% (4,25—6 м-экв/л). За сутки с мочой у человека выводится 100—300 мг кальция.

Воспроизводимость метода составляет ± 10%.

К недостаткам метода следует отнести визуальный характер определения точки эквивалентности (т. е. появления сине-фиолетового окрашивания) при титровании.


Библиография Биохимические методы исследования в клинике, под ред. А. А. Покровского, с. 418, М., 1969; Greenblatt 1. J. a. Hartman S. Determination of calcium in biolegical fluids, Ann. Chem., v. 23, p. 1708, 1951; Schwarzenbach G. Die komplexometrische Titration, Stuttgart, 1956, Bibliogr.

Л. H. Делекторская.