ЛЕВИНТАЛЯ СРЕДЫ

ЛЕВИНТАЛЯ СРЕДЫ (W. Levinthal, нем. бактериолог, род. в 1886 г.) — специальные среды (бульон, агар и кровяной агар), применяемые для выращивания бактерий, не растущих или плохо растущих на обычных средах.

Приготовление бульона. 100 г пропущенного через мясорубку мяса заливают 300 мл стерильной дистиллированной воды. Смесь помещают в бутыль, прибавляют 10 мл 1 н. р-ра гидрокарбоната натрия, хорошо перемешивают и оставляют на 1—2 часа в термостате при t° 37—60°. Прибавляют 0,5 а панкреатина, 2 мл 1 и. р-ра гидро-карбоната натрия и 10 мл хлороформа. Бутыль завязывают пергаментной бумагой, оставляют на сутки при t° 37°, часто встряхивают.

Заранее готовят и стерилизуют в аппарате Коха буферный р-р (8 : 1000) двухосновного фосфата натрия в дистил. воде, подкисленной соляной к-той до pH 5,6—6,6.

Смесь равных количеств мясной кашицы и буферного р-ра кипятят 1 мин., фильтруют через бумажный фильтр в горячем виде и после охлаждения доводят pH до 7,2—7,4, добавляя необходимое количество 1 и. соляной к-ты или 1 и. р-ра гидро-карбоната натрия. После повторного кипячения бульон разливают в стерильную посуду. Предварительно доведенный до кипения бульон дробно стерилизуют в аппарате Коха 3 дня подряд. Бульон применяют для культивирования кокков.

Приготовление агара. На буферном р-ре готовят 3% агар. Агар после разбухания в течение 1 — 2 час. расплавляют в аппарате Коха. Расплавленный буферный агар охлаждают до t° 70—80° и смешивают с равным объемом мясной кашицы. Смесь доводят до кипения на сильном огне и кипятят 1 мин. Агар декантируют в колбе и вновь дают вскипеть. Немедленно фильтруют через бумажный фильтр. Первую порцию фильтруют дважды.

1 н. р-ром гидрокарбоната натрия доводят pH до 7,5—7,8 и снова кипятят. Кипятить лучше порциями по 250 мл. Агар разливают в стерильные пробирки и в аппарате Коха проводят дробную стерилизацию 3 дня подряд по 10—15 мин. Среда должна быть прозрачной. Агар применяют для культивирования кокков.

Приготовление кровяного агара. Обычный 2% агар с pH 7,3—7,5 расплавляют и охлаждают до t° 45°. В растопленный агар медленно при постоянном встряхивании стерильно добавляют 5—10% дефибринированной лошадиной, кроличьей или человеческой крови. Смесь прогревают в аппарате Коха при t° 100°. Длительность прогревания зависит от количества среды; 1 л прогревают 5 мин., 2 л — 8—10 мин.; при приготовлении малых количеств среды в тонкостенных колбах прогревают 2 мин. Перегретый агар непригоден, т. к. при этом выпадают грубые шоколадно-бурого цвета хлопья. Прогревание можно проводить на водяной бане: 2—3 мин. прогревают, затем на 2 мин. оставляют на столе, повторяя эту процедуру три раза. Для осаждения среду оставляют на 2 часа при t° 60°. Верхний прозрачный слой стерильно разливают по чашкам. Для получения прозрачного агара среду можно стерильно профильтровать через необезжиренную вату. Профильтрованную среду также стерильно разливают в пробирки и чашки. Хранят не больше 3 нед. Перед употреблением агар проверяют на стерильность, выдерживая сутки в термостате. Среда применяется для выращивания бактерий — палочки инфлюэнцы, патогенных кокков и др.

См. также Питательные среды.

Библиография: Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, под ред. М. О. Биргера, с. 75, М., 1973; T и м а к о в В. Д. и Гольд-ф а р б Д. М. Основы экспериментальной медицинской бактериологии, М., 1958; L e v i n t h а I W. Nahrbouillon und Nah-ragar mit verbesserter Fleischausnutzung, Zbl. Bakt., I. Abt. Orig., Bd 121, S. 513, 1931.

И. М. Гончаренко.