ЛИФСОНА СРЕДЫ

ЛИФСОНА СРЕДЫ (E. Leifson, амер. бактериолог, род. в 1902 г.) — элективные плотные питательные среды для выделения и дифференциации микробов семейства энтеробактерий и содержащие ингибиторы (желчные соли, соли лимонной кислоты), углеводы и индикаторы.

Лифсон в 1935 г. предложил для обнаружения энтеробактерий в молоке, воде открытых водоемов и сточных водах плотную питательную среду — дезоксихолевый агар (ДА). Среда обладала элективными свойствами, обеспечивая хороший рост грамотрицательных бактерий при угнетении роста грамположительных бактерий (палочек, кокков). Если среды имели щелочные показатели pH (7,8 и выше), наблюдался слабый рост энтерококков. Факт подавления роения протеев позволил использовать среду дезоксихолевый агар для оценки обсемененности молока, воды, сточных вод кишечными бактериями путем подсчета выросших колоний при посеве соответствующих разведений указанных выше жидкостей. Дезоксихолевый агар может быть применен для выделения вибрионов. В оригинальной среде в этом случае увеличивают содержание пептонов до 2% и повышают щелочность среды (pH 8,0 и более).

Основой элективного действия дезоксихолевого агара является дезоксихолевый натрий, а дифференциация энтеробактерий достигается добавлением в среду лактозы и индикатора нейтрального красного. На дезоксихолевом агаре сальмонеллы и шигеллы формируют бесцветные колонии и не изменяют исходного цвета среды. Эшерихии, расщепляющие лактозу, вызывают резкое пожелтение среды вокруг колонии.

Среду готовят путем добавления к 1 л воды пептона — 10 г, агар-агара — 15—17 г, NaCl — 5 г, лактозы - 10 г, лимоннокислого железа с лимоннокислым аммонием — 2 г, K2HPO4 —2 г, дезоксихолевокислого натра —1 г, нейтрального красного __ 0,033 г. После полного растворения устанавливается pH среды 7,4.

Оригинальную среду дезоксихолевый агар и ее модификации выпускают в сухом виде фирмы «Дифко» (США), «Океоид» (Англия), «Мерк» (ФРГ), «Эйкен» (Япония).

В Советском Союзе среда не нашла широкого применения. Для обнаружения энтеробактерий используют среду Эндо (см. Левина среда).

Для выделения патогенных энтеробактерий Лифсон (1935) разработал плотную среду дезоксихолевоцитратный агар (ДЦА). В состав среды входят: мясная вода — 1000 мл, пептон — Юг, агар-агар — 20г, лактоза — 10 г, лимоннокислый натр — 25 г, дезоксихолевокислый натр — 5 г, хлористый свинец — 0,0035 г (1 : 300 000), лимоннокислое железо с лимоннокислым аммонием — 2 г, нейтральный красный — 0,02 г (1 : 50 000). После растворения устанавливается pH 7,4. Селективность среды обеспечивается ингибирующим действием на грамположительную и грамотрицательную сапрофитную и условно-патогенную флору дезоксихолевокислого натрия в сочетании с лимоннокислым натрием при сохранении роста салмонелл и шигелл.

Токсическое действие дезоксихолевокислого и лимоннокислого натрия усиливается аэробными условиями культивирования и накоплением в среде кислых продуктов метаболизма бактерий. Выраженный бактериостатический эффект дезоксихолевоцитратного агара в отношении грамположительных бактерий и грамотрицательных условно-патогенных энтеробактерий позволяет обнаруживать малые количества возбудителей острых кишечных инфекций благодаря возможности внесения на чашки со средой большого количества исследуемого материала. Снятие антагонистического действия сопутствующих микробов, у которых нарушается жизнедеятельность и рост, улучшает условия для размножения и формирования колоний большинства видов сальмонелл и шигелл. Вместе с тем замечено, что дезоксихолевоцитратный агар обладает разной степенью ингибирующего воздействия на некоторые виды сальмонелл, на нем не растут S. gallinarum, S. pullorum, слабо вырастают некоторые штаммы S. enteritidis, S. choleraesuis, S. ovis и шигелл группы В. В меньшей степени задерживается рост отдельных штаммов других видов сальмонелл и шигелл.

Поскольку оригинальная среда дезоксихолевоцитратного агара имеет недостатки, появилось значительное число ее модификаций (DCA-Hynes; DCLS-agar; XLD-agar; SS-agar; SS-SB-agar и др.), когда путем изменения соотношения отдельных ингредиентов или введения дополнительных углеводов (сахароза, ксилоза), аминокислот (лизин) достигалось увеличение ингибирующего действия или селективных и дифференцирующих свойств среды.

В Советском Союзе разработана и широко используется сухая питательная среда Плоскирева (см. Плоскирева среда), к-рая является одной из модификаций дезоксихолевоцитратного агара.

Дезоксихолевоцитратный агар и разработанные на основе этой среды модификации применяются в бактериол. лабораториях многих стран. В связи с тем что среды выпускают как сухие препараты, их приготовляют согласно прилагаемому наставлению: растворяют определенную навеску сухого вещества в 1 л воды, нагревают и кипятят до полного растворения. В случае необходимости проводят стерилизацию.

Многолетнее применение перечисленных элективных, селективнодифференциальных сред подтвердило их большую диагностическую ценность как для клинико-бактериол., так и для сан.-эпид, целей.

Для улучшения копродиагнотики брюшного тифа и паратифа В. Лифсон в 1936 г. предложил жидкую среду обогащения — селенитовый бульон. Им было показано, что селеноватокислый натрий высокотоксичен для большинства эшерихий, шигелл и протеев, но не снижает скорости размножения большинства сальмонелл. Среда обогащения Лифсона широко применяется при бактериол, диагностике сальмонеллезов и для выделения сальмонелл из пищевых продуктов.

См. также Питательные среды.

Библиография: Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней, под ред. К. И. Матвеева, с. 107, М., 1973; Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, под ред. М. О. Биргера, с. 56, М., 1973; Leifson E. New culture media based on sodium desoxycholate for isolation of intestinal pathogens and for the enumeration of colon bacilli in milk and water, J. Path. Bact., v. 40, p. 581, 1935; он же, New selenite enrichment media for isolation of typhoid and paratyphoid (Salmonella) bacilli, Amer. J. Hyg., v. 24, p. 423, 1936.

3. М. Андреева.