ЗАКСА-ВИТЕБСКОГО РЕАКЦИЯ

Категория :

Описание

Закса-Витебского реакция (H. Sachs, немецкий иммунолог, 1877— 1945; E. Witebsky, немецкий иммунолог, род. в 1901 г.; син. цитохолевая реакция) — реакция преципитации (флоккуляции, или осадочная). Предложена Г. Заксом и Витебским в 1928 г. для серодиагностики сифилиса.

Принцип реакции основан на образовании макроскопического преципитата в смеси сыворотки больного сифилисом с антигеном; с сывороткой здоровых лиц преципитата не образуется.

Особенности реакции: а) реакция быстрая (Citocholreaktion) — выполняется в течение часа, результат читают немедленно по выполнении в отличие от реакции Закса — Георги (Lentocholreaktion), предложенной в 1918 г., результат к-рой читается через сутки после постановки (ныне не применяется); б) антиген — неспецифический гаптен с добавлением холестерина (впервые Г. Закс предложил добавлять его в 1911 г.); сам по себе холестерин не является антигеном; увеличивая молекулу последнего, он повышает его чувствительность; в других реакциях с этой целью применяют толутанский бальзам, бензойную к-ту и др.

Приготовление антигена

Мышцы от 10—15 бычьих сердец освобождают от жира и сухожилий, тщательно измельчают через мясорубку и экстрагируют 5-кратным объемом 96% спирта в течение 15 дней при ежедневном 20-минутном встряхивании. Полученный «основной» первичный экстракт выпаривают досуха в эмалированной или фарфоровой чашке на водяной бане либо в колбе под вакуумом. Для растворения насыщенно-желтого вязкого остатка липоидов добавляют горячий этиловый спирт в количестве, равном 1/3 объема, взятого для экстрагирования мышцы; оставшиеся нерастворенными балластные вещества выбрасывают.

Концентрированный экстракт оставляют на 2—3 дня при комнатной температуре, фильтруют в холодном виде и холестеринизируют; в большинстве случаев к экстракту добавляют 0,3—0,6% кристаллического холестерина в зависимости от результатов титрования на положительных и отрицательных сыворотках. Цитохолевый антиген отличается стойкостью; хранить его следует при комнатной температуре в запаянных ампулах либо под тугой корковой пробкой.

Методика реакции

1 мл цитохолевого антигена быстро приливают к 2 мл физиологического р-ра; антигенную эмульсию оставляют при комнатной температуре на 10— 15 мин. до появления в ней хлопьев. В пробирку к 0,2 мл инактивированной сыворотки добавляют 0,1 мл антигенной эмульсии. После трехминутного встряхивания опыт оставляют на 30 мин., затем добавляют по 1 мл физиол, р-ра. В контроль антигена (один для всего опыта) наливают по 1,2 мл физиол, р-ра и 0,1 мл антигенной эмульсии; в контрольной пробирке не должно быть преципитата. Опыт можно ставить в половинных дозах. Учет результатов проводится невооруженным глазом или под лупой. У больных сифилисом (см.) в зависимости от его стадии и лечения наблюдаются различные по величине и количеству хлопья (4+, 3+, 2+); у здоровых лиц содержимое пробирок опалесцирует.

Цитохолевая реакция была испытана многими исследователями, отличается высокой чувствительностью, специфичностью и получила всеобщее признание; в СССР она входит в общепринятый комплекс реакций на сифилис. Наиболее чувствительна цитохолевая реакция при скрытом сифилисе и сифилисе нервной системы.

В 1931 г. Г. Закс и Витебский предложили новую модификацию, для к-рой антиген разводят двухфазно: к 1 ч. антигена добавляют 2 ч. физиол, р-ра; смесь оставляют при комнатной t° на 5 мин., затем добавляют 9 ч. физиол. р-ра. Для повышения чувствительности модификации авторы разводили антиген в 2—3% р-ре поваренной соли. Методика реакции та же. Эта модификация проверена на значительном количестве сывороток, но в практической работе не применяется.

Цитохолевая реакция может быть применена как количественная реакция с разными разведениями испытуемой сыворотки (1 :4; 1 :8; 1 : 16; 1 : 32 и т. д.), что дает возможность судить о динамике реагинов под влиянием терапии (С. М. Плотичер, 1948). Она может быть поставлена как микрореакция на предметном стекле (С. Л. Ширвиндт, 1940).

Цитохолевая реакция по своей чувствительности, специфичности, простоте техники и легкости чтения результатов является ценным методом для серодиагностики сифилиса.

Широкое применение получила экспресс-диагностика сифилиса, к-рая осуществляется путем ряда микрореакций на стекле с использованием кардиолипинового антигена. Применяются микрореакции с плазмой крови, с активной и инактивированной сывороткой.

Простота техники, легкость чтения результатов, дешевизна (микрореакция в 16—17 раз дешевле реакции Вассермана) позволяют рекомендовать микрореакции для массового обследования соматических больных и при профосмотрах.

См. также Преципитация.


Библиография: Овчинников H. М. и др. Сравнительное изучение некоторых ускоренных реакций на сифилис, Вестн, дерм, и вен., № 1, с. 32, 1977, библиогр.; Резникова Л. С., Эпштейн-Литвак Р. В. и Леви М. И. Серологические методы исследования при диагностике инфекционных болезней, с. 229, М., 1962; Sachs Н. u. Witebsky Е. Zur Serodiagnostik der Syphilis mittels Ausflockung cholesterinierter Extrakte, Klin. Wschr., S. 1233, 1928; они же, Zur Anwendung von Citocholextrakten fuir die Serodiagnostik der Syphilis mittels Ausflockung, ibid., S. 1993, 1931.


Л. С. Резникова.