ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ лабораторной диагностики

Категория :

Описание

ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ лабораторной диагностики — методы ускоренного проведения лабораторных анализов, позволяющие в течение от нескольких секунд до 10—15 минут определить в исследуемом биологическом материале присутствие какого-либо субстрата или количественные отклонения в его содержании, имеющие диагностическое значение. Объектами экстренных лабораторных исследований обычно являются кровь, моча, иногда цереброспинальная жидкость, полостной экссудат, рвотные массы, кал. Ускоренная технология внедряется и в цитологические исследования, особенно при проведении срочной биопсии (см.) тканей во время хирургической операции.

До середины 20 века для экстренной диагностики использовались лишь некоторые традиционные лабораторные методы, не требовавшие значительных затрат времени. С 50-х годов экспресс-методы лабораторной диагностики стали развиваться главным образом на основе двух направлений научно-технического прогресса: в связи с разработкой и внедрением в практику клинических лабораторий автоматизированных систем, ускоряющих исследование морфологического и биохимического состава крови и мочи (см. Автоанализаторы), и на основе достижений химии и химической промышленности, обеспечивших возможность производства так называемых экспресс-тестов, прототипом которых была лакмусовая бумажка, используемая для экспресс-метода определения кислой или щелочной реакции среды.

Современные экспресс-тесты представляют собой наборы химических реактивов в виде таблеток, гранул, порошков или содержащих реактивы полосок фильтровальной бумаги, с помощью которых можно определить наличие различных химических компонентов в биологических жидкостях (так называемый качественный тест) или приблизительно оценить их количественное содержание (так называемый полуколичественный тест). Таблетки, гранулы и порошки обычно предназначены для определения какого-либо одного компонента, то есть являются монотестами. Бумажные полоски, содержащие реактивы, имеют несколько индикаторных зон, то есть представляют собой политесты, позволяющие получить результаты по пяти и более параметрам химического состава одновременно.

Экспресс-методы, проводимые с помощью экспресс-тестов, основаны на известных из классических методов анализа химических реакциях, в которых взаимодействие субстрата и реактива сопровождается образованием соединений с определенной окраской. На таблетку или на индикаторную зону бумажной полоски наносят исследуемую жидкость (чаще полоску погружают в жидкость) и по времени появления окраски, по интенсивности цвета или величине окрашенной зоны судят о наличии или отсутствии исследуемого вещества. Сравнение интенсивности окраски индикаторной зоны с цветными бумажными стандартами позволяет приблизительно оценить количественное содержание определяемого субстрата в жидкости (полуколичественный метод).

В сыворотке крови с помощью реактивных бумажных полосок определяют содержание мочевины — полуколичественные экспресс-тесты «Уреатест» (СССР) и «Уранал» (ГДР); активность холинэстеразы, изменяющейся при отравлениях фосфорорганическими ядами, заболеваниях печени, инфаркте миокарда,— «Реактивная бумага для определения активности холинэстеразы» (СССР), «Биофан-С» (ГДР). В цельной крови определяют содержание глюкозы — полуколичественный экспресс-тест «Декстронал» (ГДР). К числу наиболее распространенных экспресс-методов исследования мочи с использованием экспресс-тестов относятся полуколичественные методы определения глюкозы «Глюкотест» (СССР), «Биофан-2» (ГДР), «Глюкофан» (ЧССР); качественные и полуколичественные методы определения ацетона и кетоновых тел с помощью специального набора реактивов (СССР), реагност-ацетонреактивных таблеток (ГДР), кетофан-диагностических полосок (ЧССР); полуколичественный метод определения белка с помощью биофан-Е-реактивной бумаги (ГДР); обнаружение и полуколичественный метод определения примеси крови таблетками «Реагност-гемоглобин» (ГДР) или гемофан-реактивной бумагой (ЧССР); обнаружение билирубина и полуколичественный метод определения уробилина в моче с помощью реактивных таблеток (ГДР) или УБГ-фан-реактивной бумаги (ЧССР); определение аскорбиновой к-ты («Аскофан», ЧССР); бактериурии («Нитрифан», ЧССР). Перспективным является использование политестов, таких как «Альбуфан» (ЧССР) на белок и pH; «Биофан-3» (ГДР) — на белок, глюкозу и pH; «Тетра-фан» (ЧССР) — на наличие восстанавливающих веществ, глюкозы, белка; наличие перечисленных выше субстратов, а также кетонов может быть определено с помощью политеста «Пента-фан» (ЧССР).

Для получения достоверных результатов с помощью экспресс-тестов следует использовать свежую хорошо смешанную мочу, негемолизированную сыворотку крови. При оценке результатов сравнение с цветной шкалой следует проводить в установленные инструкцией сроки с момента начала реакции; цветную шкалу необходимо предохранять от воздействия солнечных лучей, контакта с химическими веществами. Реактивные бумажные полоски чувствительны к действию влаги и тепла, поэтому их хранят в плотных упаковках в прохладном месте, не допускают прикосновения пальцами к зонам индикации. Требуется регулярный контроль качества экспресс-тестов путем сопоставления их результатов с данными других методов лабораторных исследований.

По сравнению с обычными лабораторными методами экспресс-методы, основанные на использовании экспресс-тестов, отличаются рядом преимуществ.

1. Быстрота анализа, которая не может быть достигнута известными приемами механизации или автоматизации лабораторных работ и процессов. Так, для определения сахара в крови с помощью реактивной бумаги «Декстронал» требуется всего 60 секунд. 2. Простота исследования; оно может быть произведено любым врачом или обученной медсестрой. 3. Экономичность; экспресс-тесты могут применяться без какого-либо вспомогательного оборудования, лабораторной посуды, оптических и электронных приборов. 4. Сухие реактивы устойчивее жидких, компактнее, удобнее при транспортировке и хранения. В то же время качественные экспресс-тесты отличаются высокой надежностью, а полуколичественные обладают вполне достаточной точностью для диагностических заключений.

Экспресс-методы необходимы прежде всего в неотложных случаях для диагностики угрожающих жизни состояний, когда результаты анализа нужно получить срочно у постели больного, в условиях помощи на дому. Особенно важны они для отделений интенсивной терапии и реанимации, где имеются штатные или внештатные врачи и лаборанты, обеспечивающие круглосуточное проведение исследований. Такие лаборатории, кроме биохимических экспресс-тестов, выполняют клин. анализы крови (определение количества эритроцитов, лейкоцитов. гемоглобина), определяют группы крови, резус-фактор, время свертывания крови, гематокритное число, кислотнощелочное состояние, содержание в крови электролитов, исследуют кал на скрытую кровь и др. Использование современной экспрессной аппаратуры позволяет в короткий срок в одной пробе крови определить одновременно 10 параметров (причем результат выдается автоматически на печатающем устройстве), установить с помощью селективных электродов содержание ионов натрия, калия и др.

Экспресс-методы, основанные на применения экспресс-тестов, все шире используются в приемных отделениях больниц, в амбулаторной практике, в том числе при посещении больных на дому врачом или средним медперсоналом. Они могут применяться и самими больными, предварительно проинструктированными, в порядке самонаблюдения («карманная» лаборатория), например, больные сахарным диабетом с помощью специальных бумажных полосок «Глюкотест» могут определять качественное я полуколичественное содержание в моче глюкозы. В приемных отделениях больниц экспресс-тесты помогают сортировке поступающих больных, способствуют сокращению периода обследования, что позволяет быстрее начать правильное лечение, а в итоге уменьшает сроки пребывания больного в стационаре.

В процессе перехода к ежегодной диспансеризации всего населения применение экспресс-методов значительно расширяет возможности скринирующих обследований (см. Скрининг в медицине), дает возможность сократить число трудоемких лабораторных исследований в 3—4 раза, так как необходимость в количественных биохимических исследованиях в лабораториях при этом возникает только в случае выявления патологии с помощью экспресс-тестов. Например, при подозрении на гаргоилизм (см.) наличие кислых мукополисахаридов в моче может быть установлено с помощью упрощенного теста с кислым альбумином, реакции Бера с толуидиновым синим или по помутнению мочи в реакции с цетилпиридинхлоридом (цетвалоном) в цитратном буфере, что позволяет значительно уменьшить число трудоемких исследований с помощью ионообменной хроматографии (см.) и электрофореза (см.) на бумаге или ацетатцеллюлозе.

Перспективы развития экспресс-методов лабораторной диагностики связаны с разработкой и дальнейшим совершенствованием систем автоматизации лабораторных исследований, с созданием новых дифференцированных экспресс-тестов для качественного и количественного анализа биол. материалов, а также с совершенствованием лабораторной техники (см.). Одним из направлений развития экспресс-методов является разработка и внедрение микроэкспресс-методов, при которых используется максимально ограниченный объем биологических жидкостей. Так, микроэкспресс-метод определения протромбинового индекса сокращает необходимый для анализа объем крови с 0,5 мл до 0,08 мл. Для экспресс-диагностики нарушений кислотно-щелочного баланса разработан микрометод Аструпа на основе прямолинейной зависимости между log pCO2 и pH крови. В отличие от трудоемкого метода Ван-Слайка (см. Ван-Слайка методы), микрометод Аструпа позволяет за 3—5 минуты в 0,1 мл капиллярной крови определить одновременно pH, рСО2, избыток оснований в цельной крови, а также стандартные и истинные бикарбонаты и общую углекислоту плазмы крови (см. Кислотно-щелочное равновесие).

Библиогр.: Пути совершенствования деятельности клинико-диагностических лабораторий, под ред. В, В. Меньшикова, с. 79, М., 1976; Тодоров Й. Клинические лабораторные исследования в педиатрии, пер. с болг., София, 1968; Beck С., Maurer H.-C. u. 811-bersiepe М. Blutzuckerechnellbestimmung mit Dextrostix (Streifenteet), Med. Labor., Bd 20, 8. 88, 1967.

E. E. Гогин, Г. В. Литвиненко.