ЗЛАТКИСА-ЗАКА МЕТОД

ЗЛАТКИСА-ЗАКА МЕТОД (А. Zlatkis, В. Zak) — количественный метод определения концентрации холестерина в сыворотке крови. Метод основан на определении интенсивности красно-фиолетового окрашивания, развивающегося при взаимодействии холестерина с уксусной и серной к-тами в присутствии хлорного железа.

Реактивы

Ледяная уксусная к-та, чистота к-рой проверена при помощи перманганата калия (цвет к-ты не должен изменяться после добавления нескольких кристалликов перманганата в течение 40 мин.); конц. серная к-та; конц. ортофосфорная к-та; основной р-р хлорного железа (2,5 г FeCl₃-6H₂O растворяют при нагревании в 80 мл ортофосфорной к-ты, охлаждают и доводят объем р-ра до 100 мл); рабочий р-р хлорного железа (8 мл основного р-ра хлорного железа смешивают с 80 мл серной к-ты, после охлаждения объем доводят до 100 мл); стандартный р-р холестерина (100 мг холестерина растворяют в 70—80 мл ледяной уксусной к-ты при нагревании и после охлаждения доводят объем до 100 мл ледяной уксусной к-той; 1 мл этого р-ра содержит 1 мг холестерина). Хранят стандартный р-р холестерина при комнатной температуре, он годен к употреблению в течение 6—7 дней.

Ход определения

К 0,1 мл сыворотки крови приливают 3 мл ледяной уксусной к-ты и 2 мл рабочего р-ра хлорного железа. Содержимое пробирки тщательно перемешивают и после 15-минутного стояния колориметрируют при 510— 560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см. Контролем служит проба, в к-рой вместо сыворотки крови используется дист. вода.

Расчет производят по калибровочной кривой. При содержании холестерина выше 350 мг% сыворотку крови разводят физиол, р-ром. Разведение учитывается при расчете.

В норме в сыворотке крови содержится 120—250 мг% холестерина, с возрастом его концентрация в крови несколько повышается. При атеросклерозе (ранние стадии), гипофункции щитовидной железы, нефропатическом синдроме, эссенциальной гиперхолестеринемии и т. п. содержание холестерина в сыворотке крови возрастает.

3.— З.м. предложен в качестве унифицированного метода.

См. также Холестерин.

Библиография: Джорджеску П. и Пэунeску Е. Биохимические методы диагноза и исследования, пер. с румын., с. 341, Бухарест, 1963.

В. А. Попков.