ПАУЛЯ-БУННЕЛЛЯ РЕАКЦИЯ

ПАУЛЯ-БУННЕЛЛЯ РЕАКЦИЯ (J. R. Paul, амер. врач, род. в 1893 г.; W. W. Bunnell, амер. врач, род. в 1902 г.; син. Хангануциу — Пауля— Буннелля реакция) — неспецифический лабораторный тест распознавания инфекционного мононуклеоза, основанный на выявлении в сыворотке крови больных повышенного уровня агглютининов к гетерогенным эритроцитам (гетерогемагглютининов). В начале 30-х гг. Пауль и Буннелль, изучая обнаруживаемые при ревматизме гетерофильные антитела — тест, предложенный ранее Хангануциу (М. Hanganutziu), — подметили, что титр этих неспецифических антител наиболее высок при инфекционном мононуклеозе. Определение с диагностической целью при инфекционном мононуклеозе гетерофильных антител в сыворотке крови получило название Пауля-Буннелля реакции. Для повышения специфичности реакции Дейвидсон и Уолкер (I. Davidsohn, P. H. Walker, 1935) предложили применять сыворотки крови, предварительно адсорбированные тканью почек морской свинки и эритроцитами быка. В научной литературе Пауля-Буннелля реакция, проводимая на стекле с фирменными реагентами, называется монотестом для диагностики инфекционного мононуклеоза. В СССР Пауля-Буннелля реакция применяется в основном в научно-исследовательских учреждениях клинического профиля.

Гетерогемагглютинины относятся к системе гетерофильных антител, как антитела Форссмана и холодовые агглютинины (см. Антитела), постоянно присутствующие (90— 95% случаев) в низких титрах (1 : 10, редко 1 : 40) в сыворотках крови людей. Они принадлежат к классу IgG и адсорбируются на суспензии ткани почек морской свинки. Антитела, сопутствующие инфекционному мононуклеозу, относятся к классу IgM (титр их 1 : 80 и выше — до 1 : 1280) и адсорбируются лишь эритроцитами быка, что служит тестом для их дифференциации. Эти антитела появляются в крови в остром периоде болезни, начиная с первой недели, т. е. в период, когда клинически поставить диагноз не всегда возможно в связи с наличием симптомов, часто встречающихся и при других нозологических формах (лихорадка, увеличение лимфатических узлов, катар верхних дыхательных путей и т. д.). Гетерофильные антитела обнаруживаются в 50—80% случаев инфекционного мононуклеоза, поэтому их отсутствие не исключает клин, диагноза болезни. Высокие титры подобного рода антител могут наблюдаться и при других заболеваниях (вирусном гепатите, лейкемии, скарлатине и др.). Особенно высокий и стойкий уровень их отмечается при циррозе печени.

Для постановки реакции используют свежие эритроциты барана в виде 2% взвеси в изотоническом р-ре хлорида натрия и 10% суспензию ткани почек морской свинки. Хранение готовых эритроцитов даже в течение суток приводит к снижению их агглютинабельности.

Реакция может быть поставлена в двух вариантах: ориентировочно и развернуто. В первом случае определяется наличие или отсутствие гетерофильных антител, во втором — их титр. Как в том, так и в другом случае испытуемая сыворотка крови больного должна быть прогрета перед исследованием при t° 56° в течение 30 мин. или при t° 63° в течение 3 мин. и истощена (адсорбирована) тканью почек морской свинки. Ориентировочно реакция ставится подобно реакции определения групп крови: к одной капле суспензии эритроцитов барана на стекле добавляют 3 капли исследуемой сыворотки крови и смешивают, покачивая стекло. Появление конгломератов эритроцитов в течение минуты свидетельствует о наличии антител.

Для определения титра антител проводят развернутую реакцию. Для этого готовят двукратные серийные разведения сыворотки крови (начиная с 1 : 5 до 1 : 1280) в изотоническом р-ре хлорида натрия в объеме 0,5 мл. В каждую пробирку добавляют по 0,5 мл 2% взвеси эритроцитов барана, тщательно встряхивают, помещают на 1 час в водяную баню при t° 37°, а затем на ночь при t° 4°. В контрольную пробирку с 2% взвесью эритроцитов вместо сыворотки крови соответствующего разведения прибавляют 0,5 мл изотонического р-ра хлорида натрия.

Учет реакции проводят на следующий день, т. е. после осаждения эритроцитов. При необходимости более быстрого ответа пробирки со взвесью эритроцитов центрифугируют в течение 15 мин., а затем осторожно встряхивают. В контрольной пробирке при встряхивании наблюдается равномерная взвесь эритроцитов, а в опытных — конгломераты эритроцитов различной интенсивности. Титром антител считают последнее разведение сыворотки, при к-ром отмечаются конгломераты эритроцитов.

Гетерофильные антитела, определяемые в П. — Б. р., достигают максимального уровня к концу 4-й нед. и могут длительно обнаруживаться.

Для диагностики инфекционного мононуклеоза в нек-рых странах, в частности в США, выпускаются тестирующие наборы, большинство из них включает тест агглютинации на стекле, обычно проводимый с одним разведением сыворотки и с фор-малинизированными эритроцитами; применяются также эритроциты, обработанные папаином.

Библиография: Ананьев В. А. и др. Реакция гетерогеммагглютинации при болезни Боткина, в кн.: Болезнь Боткина, под ред. E. М. Тареева и А. К. Шубладзе, с. 221, М., 1956;

Руководство по клиническим лабораторным исследованиям, под ред. Е. А. Кост и Л. Г. Смирновой, с. 876, М., 1964;

Davidsohn I. Serologic diagnosis of infectious mononucleosis, J. Amer, med. Ass., v. 108, p. 289, 1937; Davi d-sohn I. a. Walker P. H. Nature of heterophilic antibodies in infectious mononucleosis, Amer. J. clin. Path., v. 5, p. 455, 1935; Paul J. R. a. Bunnell W. W. The presence of heterophile antibodies in ihfectious mononucleosis, Amer. J. med. Sci., y. 183, p. 90, 1932.

В. А. Ананьев.