ГЕМОГРАММА

Кровь для исследования рекомендуется брать утром натощак или через час после легкого завтрака. В лабораторной практике исследуют обычно капиллярную кровь (можно брать кровь из вены). Кровь берут путем укола иглой мякоти пальца или мочки уха, а у детей раннего возраста — мякоти пятки. Следует пользоваться иглами-скарификаторами со съемными копьями или перьями-скарификаторами (рис. 1 и 2), которые после работы кипятят в стерилизаторе или помещают на 2 часа в сушильный шкаф при температуре 180°.

Кожу на месте укола последовательно протирают двумя тампонами: сначала смоченным спиртом, затем эфиром. При такой обработке кожи капля крови, выступающая из прокола, не расплывается. Укол нужно делать сбоку, где капиллярная сеть гуще, на глубину 2—3 мм в зависимости от толщины кожи, чтобы кровь вытекала свободно. При сильном надавливании к крови будет примешиваться тканевая жидкость, что может повлиять на результаты анализа. Важно соблюдать последовательность взятия крови для исследования отдельных показателей: после снятия (ваткой) первой капли набирают кровь для определения РОЭ, для определения количества гемоглобина, для подсчета общего количества эритроцитов, для подсчета общего количества лейкоцитов, делают мазки (обычно два) с целью подсчета лейкоцитарной формулы и изучения морфологии эритроцитов; для подсчета ретикулоцитов мазки делают на специально подготовленных стеклах.

Для определения времени свертывания крови и продолжительности кровотечения, а также для подсчета количества тромбоцитов производят отдельные проколы кожи.

Определение количества гемоглобина можно производить различными способами. В лабораторной практике с этой целью чаще используют гемометр типа Сали (см. Гемоглобинометрия).

Нормы гемоглобина для мужчин 14,5 г% (колебания 13,0—16,0 г%) и для женщин 13,0 г% (колебания 12,0-14,0 г%).

Уменьшение концентрации гемоглобина в крови наблюдается при анемиях различной этиологии (при кровопотере, дефиците витамина В₁₂, железа, повышенном гемолизе эритроцитов и др.). Увеличение концентрации гемоглобина встречается при эритремии, вторичных, или симптоматических, эритроцитозах. При сгущении крови может наступить относительное увеличение концентрации гемоглобина.

Общее количество эритроцитов подсчитывают в 1 мкл крови. Взятие крови можно производить меланжерным (в меланжеры или смесители) или пробирочным методом (в пробирки, по H. М. Николаеву) с последующим подсчетом эритроцитов в счетной камере под микроскопом (см. Камеры счетные). Подсчитывают эритроциты и в фотоэлектрическом эритрогемометре, а также с помощью целлоскопа.

Количество эритроцитов в норме у мужчин 4 000 000—5 000 000 в 1 мкл крови, у женщин 3 700 000 — 4 700 000. Увеличение количества эритроцитов обычно отмечается при заболеваниях, для которых характерно увеличение концентрации гемоглобина (напр., полицитемия, вторичные эритроцитозы и др.). Уменьшение количества эритроцитов наблюдается при понижении эритробластической функции костного мозга (гипо- и апластические процессы), при патологически измененном костном мозге (лейкозы, миеломная болезнь, метастазы злокачественных опухолей и др.), вследствие усиленного распада эритроцитов (гемолитические анемии), при дефиците в организме железа, витамина В₁₂, при кровотечениях.

Цветной показатель — показатель, выражающий относительное содержание гемоглобина в одном эритроците в единицах Сали. Если содержание гемоглобина измерено в грамм-процентах, то цветной показатель вычисляют путем деления утроенного показателя количества гемоглобина в грамм-процентах на первые две цифры показателя числа эритроцитов (напр., гемоглобина 14,0 г% , число эритроцитов 4 200 000; цветной показатель = 1,0). Если содержание гемоглобина выражено в единицах Сали, то этот показатель делят на удвоенные первые две цифры показателя содержания эритроцитов (напр., гемоглобина 84 ед., число эритроцитов —4 200 000; цветной показатель 84/(2•42) = 1,0). В норме цветной показатель колеблется от 0,85 до 1,15. Величина цветного показателя имеет значение при определении формы анемий: цветной показатель ниже 0,85—гипохромные, цветной показатель 0,85—1,15—нормохром-ные, цветной показатель выше 1,15— гиперхромные.

Среднее содержание гемоглобина в одном эритроците в абс. исчислении принято обозначать в пикограммах (пг). Оно определяется путем деления показателя содержания гемоглобина в 1 мкл крови на количество эритроцитов в том же объеме. Напр., средняя величина содержания эритроцитов в 1 мкл крови — 5 000 000; средняя величина содержания гемоглобина —16,7 г%, что составляет 0,000167 г, или 167 000 000 пг в 1 мкл крови. Следовательно, содержание гемоглобина в одном эритроците составит 167000000/5000000 = 33,4 пг.

Практически среднюю величину содержания гемоглобина в одном эритроците можно получить путем умножения количества гемоглобина в грамм-процентах на 10 и деления произведения этих чисел на число эритроцитов в 1 мл крови: 16,7•10/5 = 33,4 пг. Среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците у взрослых колеблется от 27 до 33,4 пг.

Гиперхромазия (см. Гиперхромазия, гипохромазия) зависит от увеличения объема эритроцитов (макроциты, мегалоциты), а не от степени насыщения их гемоглобином и является показателем нарушения функции печени, нарушения обмена витамина В₁₂ или его недостатка в организме (Пернициозная анемия). В этих случаях содержание гемоглобина в одном эритроците повышается до 50 пг. Гипохромазия наблюдается при уменьшении объема эритроцитов (микроциты) или уменьшении содержания гемоглобина в нормальном по объему эритроците. Среднее содержание гемоглобина в одном эритроците понижается до 20 пг.

Скорость оседания эритроцитов ( СОЭ, см. Оседание эритроцитов) выражается в миллиметрах плазмы, отстаивающейся в течение 1 часа. В норме у женщин она составляет до 14—15 мм в час, у мужчин — до 10 мм в час.

Изменение скорости оседания эритроцитов не является специфичным для какого-либо заболевания. Однако ускорение оседания эритроцитов всегда указывает на наличие патол, процесса.

Количество ретикулоцитов подсчитывают в мазках крови, прижизненно окрашенных 1% р-ром бриллианткрезилблау в абс. спирте. На заранее подготовленных предметных стеклах (подготовка заключается в нанесении на хорошо вымытое, обезжиренное и подогретое стекло краски в виде мазка) делают тонкие мазки крови и стекло сразу помещают во влажную камеру (чашку Петри, по краям к-рой укладывают смоченные валики из марли или ваты). Камеру ставят в термостат при t° 37° на 3—5 мин. Затем мазки высушивают на воздухе. Подсчитывают количество ретикулоцитов на 1000 эритроцитов; результаты исследования выражают в промилле. В норме содержание их в периферической крови составляет 2—10‰.

Ретикулоциты — это молодые эритроциты, в которых с помощью суправитальной окраски выявляется зернисто-сетчатая субстанция. Ретикулоцит по выходе из костного мозга в периферическую кровь превращается в зрелый эритроцит. Считают, что окончательное созревание их совершается в течение нескольких часов.

Количество тромбоцитов можно подсчитать различными методами.

1. В мазках периферической крови количество тромбоцитов подсчитывают на 1000 эритроцитов. Кровь для мазков берут из пальца. На место укола предварительно наносят каплю 14% р-ра сульфата магния; выделившуюся каплю крови смешивают с сульфатом магния и делают мазок на стекле; мазки красят по Романовскому 2—3 часа; зная количество эритроцитов в 1 мкл крови, вычисляют количество тромбоцитов в 1 мкл крови. Напр., при подсчете на 1000 эритроцитов встретилось 60 тромбоцитов; количество эритроцитов в 1 мкл крови — 5 000 000, следовательно, количество тромбоцитов составит 60x5000, или 300 000.

2. В счетной камере тромбоциты подсчитывают после предварительного лизирования эритроцитов с использованием фазово-контрастного микроскопа.

3. Количество тромбоцитов можно подсчитать при помощи автоматических счетчиков, напр, целлоскопа.

У взрослых людей и у детей старшего возраста количество тромбоцитов составляет 180 000—320 000 в 1 мкл. При болезни Верльгофа и симптоматических тромбоцитопениях число тромбоцитов может резко уменьшиться вплоть до полного исчезновения.

Количество лейкоцитов подсчитывают так же, как и количество эритроцитов. Среднее количество лейкоцитов у взрослого колеблется от 4000 до 9000 в 1 мкл крови. У детей оно несколько больше, у новорожденных — до 15 000— 30 000. При значительном увеличении количества лейкоцитов можно говорить о лейкопении (см.).

Лейкоцитарную формулу исследуют в окрашенных мазках крови.

Величины гематокрита определяют в гематокрите или, используя номограмму Ван-Слайка, по концентрации гемоглобина в крови (см. Гематокритное число). Гематокритное число показывает объемное соотношение форменных элементов крови и плазмы. Результаты исследования выражают либо дробным числом, в числителе к-рого объем форменных элементов, а в знаменателе — объем плазмы, либо в процентах, показывающих отношение объема форменных элементов к объему взятой крови. Нормальные величины гематокрита у мужчин 40/60—48/52 (или 40— 48%), у женщин 36/64—42/58 (или 36—42%). Увеличение объема эритроцитов наблюдается при эритроцитозах, уменьшение — при анемиях.

Морфология эритроцитов (как и лейкоцитов) исследуется в окрашенных мазках крови. Мазки крови перед окраской обрабатывают фиксирующими жидкостями (напр., метиловым спиртом) с целью предотвращения разрушения форменных элементов крови в процессе окраски. Существует много способов окраски мазков крови, основанных на хим. сродстве элементов клетки к определенным анилиновым краскам. При изучении мазков крови под микроскопом получают представление о величине, форме и окраске эритроцитов, которые могут изменяться при патол, состояниях. Размеры эритроцитов, определяемые с помощью Эритроцитометрия), Состояние, при к-ром обнаруживают эритроциты разнообразной величины, называют анизоцитозом, что может быть, напр., при анемиях. Абсолютное большинство эритроцитов имеет диам. 7—8 мкм. Эритроциты диам, менее 6,5 мкм называют микроцитами, а состояние, при к-ром они преобладают,— микроцитозом (напр., при дефиците железа, при микросфероцитарной гемолитической анемии). Эритроциты диам, более 8 мкм называют макроцитами. Обнаружение их у новорожденных рассматривается как физиол, явление, макроциты исчезают к двухмесячному возрасту. Обнаруживается макроцитоз при усиленной регенерации крови, раке и полипах желудка, пониженной функции щитовидной железы, миеломатозе. Эритроциты диам, более 12 мкм называют мегалоцитами. Они могут иметь овальную форму. Кроме большой величины, для них характерны гиперхромия, отсутствие двояковогнутости (отсутствие центрального просвета) и большая толщина. Мегалоцитоз обнаруживают при недостатке в организме витамина B₁₂.

Изменение формы эритроцитов называют пойкилоцитозом. Эритроциты могут становиться овальными, грушевидными, звездчатыми, зазубренными и др. Эритроциты с резко выраженной овальной формой называют овалоцитами, которых в норме 5—10% (Г. А. Алексеев).

Овалоцитоз (до 80—90% овалоцитов) может быть носительством или патологией, к-рая ведет к развитию серповидноклеточной анемии (см.).

Полихроматофилы (см. Полихромазия)— это незрелые эритроциты, содержащие наряду с гемоглобином остатки базофильной субстанции. В зависимости от количества гемоглобина полихроматофильные эритроциты в обычных мазках (окрашенных по Романовскому) имеют различные оттенки, от синего до розовато-серого цвета. В обычных мазках, окрашенных анилиновыми красками, полихроматофильными бывают и ретикулоциты. Подсчитывают полихроматофилы в толстой капле. Мазки с толстой каплей красят по Романовскому без фиксации, при этом зрелые эритроциты гемолизируются, а молодые, незрелые, проявляются базофильно окрашенной сеточкой синевато-фиолетового цвета. В норме в толстой капле обнаруживают 1—2 эритроцита с базофильной сеточкой не в каждом поле зрения, и это обозначают как Р+, при 3—5 полихроматофилах— Р++, при 5—10—Р+++, при более значительном количестве полихроматофилов — Р++++. Этот метод неточный, но дает представление об увеличении или уменьшении количества молодых эритроцитов. Полихроматофилия является показателем регенерации эритропоэза и встречается при кровопотерях, усиленном гемолизе эритроцитов и др. В норме большое количество полихроматофилов встречается в первые дни после рождения и быстро уменьшается после двух недель.

При измененной регенерации костного мозга в периферическую кровь выходят нормобласты, а при пернициозной анемии могут быть обнаружены мегалобласты.

Ядерные формы элементов эритроидного ростка в периферической крови у взрослых наблюдаются только при тяжелых формах анемии, появление их — признак патол. регенерации. В подобных случаях могут наблюдаться также остатки ядра в виде тонкого кольца, петли, восьмерки фиолетово-синего цвета (кольца Кебота), круглых образований фиолетово-красного цвета размером 1—2 мкм (тельца Жолли) или в виде базофильной зернистости в эритроцитах.

При малярии в эритроцитах обнаруживают шюффнеровскую зернистость — мелкие розово-красные включения, заполняющие почти весь эритроцит, или 10—15 различных по размеру включений; последние иногда называют пятнистостью Маурера.

У больных с тяжелыми интоксикациями (фенилгидразином, нитробензолом, анилином, бертолетовой солью, нитроглицерином, толуолдиамином и др.), лечившихся сульфаниламидами, а также у лиц, работающих в хим. промышленности, необходимо исследовать кровь по методу Дейси с целью выявления в эритроцитах телец Гейнца — Эрлиха — округлых включений пурпурно-красного цвета; иногда они обнаруживаются внеклеточно.

Резистентность эритроцитов — свойство эритроцитов противостоять разрушительным воздействиям: осмотическим, механическим, тепловым и др. В клин, практике обычно исследуют осмотическую резистентность эритроцитов: составляется ряд пробирок с р-ром хлорида натрия по нарастающей концентрации — от 0,28 до 0,56%. В норме минимальная резистентность эритроцитов взрослых (когда начинают разрушаться первые эритроциты) колеблется между 0,48 и 0,44% хлорида натрия, максимальная (разрушены все эритроциты)— между 0,32—0,28%.

Морфология лейкоцитов может изменяться при инфекционных заболеваниях, воздействии хим. веществ, заболеваниях кроветворного аппарата, действии ионизирующего излучения.

Анизоцитоз (различная величина) лейкоцитов обнаруживается и в норме. Однако выраженный анизоцитоз — это проявление патологии.

Структурные изменения обнаруживаются как в ядре, так и в цитоплазме лейкоцита. В ядре могут быть следующие изменения: а) гиперсегментации ядра (термин «гиперсегментация» чаще употребляется для обозначения увеличения количества сегментов сегментоядерных лейкоцитов, обнаружение которых имеет диагностическое значение при пернициозной анемии, лучевой болезни); б) хроматинолиз — растворение хроматина ядра с сохранением его контура; в) кариолиз — растворение части ядра при сохранности структуры остатка ядра; г) фрагментоз — отделение от ядра 1—5 фрагментов, иногда связанных с ядром нитями базихроматина; д) пикноз — ядро становится бесструктурным вследствие уплотнения основного хроматина; одновременно уменьшается величина ядра; е) кариорексис - распад ядра на пикнотичные части округлой формы и различной величины, не связанные между собой.

Токсигенная зернистость в цитоплазме нейтрофилов в мазках, окрашенных смесями азура и эозина, выявляется недостаточно надежно. При специальных окрасках (по Фрейфельд, по Момсену, по Шмелеву) в цитоплазме обнаруживается синеватая сеточка с переходами в крупные комочки; иногда вся клетка усеяна мелкими пылевидными зернышками. Токсигенная зернистость нейтрофилов наблюдается при гнойных процессах, заболеваниях, связанных с интоксикацией, при инфекциях (дифтерия, корь, ветряная оспа, скарлатина, краснуха, пневмония). Счет нейтрофилов с токсигенной зернистостью производится по отношению к числу сосчитанных (а не на 100) нейтрофилов. Напр., всех нейтрофилов —70%, в т. ч. нейтрофилов с токсигенной зернистостью — 45%.

Цитолиз — распад клетки. Для цитолиза характерно чаще отсутствие цитоплазмы, ядро с расплывчатыми контурами, структура ядра сохранена, иногда около такого ядра имеется зернистость. Указанные изменения могут встречаться и в нормальной крови, являясь признаками обратного развития клетки, но при обнаружении их в значительном количестве рассматриваются как патология.

Морфология тромбоцитов изучается в тонких мазках крови, взятых без стабилизатора (сульфата магния), окрашенных смесью азура и эозина (по Нохту).

Обнаружение в мазке агрегатов из 5—6 тромбоцитов отмечается как хорошая агглютинабельность. В тромбоцитах видна центральная зернистая часть (грануломер) и периферическая гомогенная часть (гиаломер). Грануломер состоит из азурофильных зерен с сиреневатым оттенком. Можно различить и более тонкие детали структуры тромбоцитов — вакуоли, псевдоподии, тонкие отростки-антенны, исходящие из грануломера. На основании морфол, особенностей тромбоцитов составляется тромбоцитарная формула, к-рая может изменяться при патологии (см. Тромбоциты).

Некоторые показатели свертывания крови — время свертывания крови (см.), включенные в Г., являются ориентировочными для суждения о нарушениях системы свертывания крови.

Вязкость крови зависит от вязкости плазмы, количества эритроцитов, гемоглобина, содержания углекислоты в крови (см. Вязкость, вязкость крови). Определяется в вискозиметре (рис. 3). Принцип определения основан на сравнении скорости продвижения крови и дист, воды в строго одинаковых капиллярах и при одинаковом вакууме в системе вискозиметра. Пути, пройденные жидкостями в капиллярах в одно и то же время, обратно пропорциональны вязкости этих жидкостей. Поэтому вязкость выражают отношением длины пути, пройденного дист, водой, к длине пути, пройденного кровью. Поскольку кровь набирают до метки, вязкость крови будет равна длине пути, пройденного водой за то же время; длина пути отсчитывается по шкале. Вязкость крови у мужчин составляет от 4,3 до 5,3, у женщин — от 3,9 до 4,9.

Возбудители малярии могут быть обнаружены и в обычных мазках крови, но при направленном исследовании на плазмодии малярии необходимо брать еще так наз. толстую каплю (см.), к-рая дает возможность обнаружить паразитов даже при их малочисленности. Рекомендуется следующий способ приготовления толстой капли: на предметном стекле готовят обычный мазок крови и, пока он еще влажен, прикасаются им к вновь выступившей на месте укола капле крови. Капля крови на влажном мазке равномерно растекается правильным кругом, что исключает необходимость ее размазывания. Толстой капле дают высохнуть около получаса на воздухе в горизонтальном положении. В отличие от обычного мазка, толстую каплю не надо фиксировать, красится она как обычно азур-эозиновыми смесями. Из эритроцитов при окраске выщелачивается гемоглобин (вследствие отсутствия фиксации), поэтому можно различить лишь «тени» эритроцитов. В толстой части мазка вероятность обнаружения возбудителя больше, но иногда они хуже окрашены, чем паразиты, расположенные по краю капли.

См. также Эритроциты.

Библиография: Кассирский И. А. и Алексеев Г. А. Клиническая гематология, М., 1970; Руководство по клиническим лабораторным исследованиям, под ред. Е. А. Кост и Л. Г. Смирновой, с. 44, М., 1964; С о к о л о в В. В. и Г р иб о в а И. А. Показатели периферической крови у здоровых людей, Лаборат, дело, № 5, с. 259, 1972; Справочник по клиническим лабораторным методам исследования, под ред. Е. А. Кост, М., 1975; Справочник по функциональной диагностике, под ред. И. А. Кассирского, с. 304, М., 1970; T о д о р о в Й. Клинические лабораторные исследования в педиатрии, пер. с болг., с. 271, София, 1968.

Д. Н. Ишмухаметова.