ЦИЛЯ-НЕЛЬСЕНА МЕТОД

ЦИЛЯ — НЕЛЬСЕНА МЕТОД (F. Ziehl, немецкий бактериолог, 1857— 1926; F. К. A. Neelsen, немецкий патологоанатом, 1854—1894) — способ окраски кислотоустойчивых микроорганизмов. Циля — Нельсена метод широко используется для окраски кислотоустойчивых микобактерий туберкулеза, атипичных микобактерий, а также нокардий и некоторых других микроорганизмов.

Кислотоустойчивые микроорганизмы благодаря содержанию церолипидов не окрашиваются обычными спиртовыми растворами анилиновых красителей. Необходимо добавление протравляющих веществ, которые, нарушая проницаемость липидной оболочки микробной клетки, делают ее доступной действию красящего раствора. Р. Кох, а впоследствии П. Эрлих применяли для этого анилин, который, однако, являясь нестойким веществом, не обеспечивал получения стандартных результатов. В 1882 году Циль предложил вместо анилина использовать карболовую кислоту, а для окраски — 2% раствор метилового фиолетового в насыщенном растворе карболовой кислоты. В этом растворе препарат окрашивали 1 час, после чего промывали водой и обесцвечивали в азотной кислоте. Нельсен в 1884 году упростил метод, заменив метиловый фиолетовый раствором следующего состава: фуксин основной 1 г; 5% карболовая кислота 100 ли; 96% этиловый спирт 10 мл. Препарат в процессе окрашивания подогревают до появления пара. Гистологические препараты (срезы) красят 10—15 минут при комнатной температуре. После окраски фуксином препарат обесцвечивают 25% серной кислотой, промывают дистиллированной водой и докрашивают 1 — 2 минуты 0,5% водным раствором метиленового синего. В результате обработки препарата по Циля — Нельсена методу кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в яркий рубиново-красный цвет, остальные составные части препарата, в том числе некислотоустойчивые бактерии, — в синий цвет.

В мазках из очень молодых или старых культур микроорганизмов обнаруживаются наряду с красными более бледные с фиолетовым оттенком клетки, что указывает на их меньшую степень кислотоустойчивости.

Предлагались различные модификации Циля — Нельсена метода, которые, однако, не имели преимуществ перед оригинальным. Из современных модификаций заслуживает внимания метод приготовления мазков из мокроты с использованием глутарового альдегида, который вызывает гибель микобактерий туберкулеза. Мазки, обработанные глутаровым альдегидом, окрашивают затем по методу Циля — Нельсена.

Библиогр.: Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней, под ред. К. И. Матвеева, с. 242, М., 1973; G о 1 d f о g e 1 G. A. a. S еw e 1 1 D. L. Preparation of sputum smears for acid-fast microscopy, J. clin. Microbiol, v. 14, p. 460, 1981; Z i e h 1 F. Zur Farbung; des Tuberkelbacillus, Dtsch. med. Wschr.

S. 451, 1882. т. Б. Яблокова.