АСКОЛИ РЕАКЦИЯ
Описание
АСКОЛИ РЕАКЦИЯ — реакция преципитации (см.), используемая для диагностики сибирской язвы. Названа по имени итальянского серолога Асколи (A. Ascoli).
Асколи реакцию используют для обнаружения в исследуемом материале термостабильного сибиреязвенного антигена с помощью преципитирующей сибиреязвенной сыворотки. Исследуемый материал — кусочки органов, шкуры, кожа, шерсть павших животных, а также войлок (иногда мясо, колбаса и молочные продукты).
Положительные результаты были получены в ряде случаев и при исследовании вытяжек из земли зараженных пастбищ и скотомогильников, пыли, а также из водоемов, фуража.
Материал измельчают, заливают 5—10-кратным количеством физиологического раствора и помещают в кипящую водяную баню на 5—45 минут. Материал, содержащий жир, предварительно обезжиривают хлороформом, встряхивая в течение 10 минут. Хлороформ затем удаляют. При массовых исследованиях кож антиген экстрагируют на холоду, предварительно подвергнув материал стерилизации в автоклаве в течение 30 минут. Более полного извлечения антигена достигают при экстрагировании в тройном объеме 0,5% раствора 80% уксусной кислоты в физиологическом растворе NaCl в течение 10—15 минут в аппарате Коха или автоклаве при t° 110°. Полученный экстракт нейтрализуют и фильтруют до полной прозрачности через плотный бумажный фильтр или прокаленную асбестовую вату. Присутствие сибиреязвенного антигена в экстракте выявляют наслоением его на преципитирующую сыворотку, налитую в узкие пробирки в объеме 0,5 мл. Наслоение проводят оттянутой пастеровской пипеткой по стенке пробирки. Удобно пользоваться специальным прибором Асколи (рис.).
При положительной реакции на границе между сывороткой и экстрактом немедленно или через 5—10 минут появляется кольцеобразное помутнение, становящееся все более интенсивным. Для подтверждения специфичности полученного результата Асколи реакция сопровождается контролем (табл.).
В пробирках 4 и 5, в которых отсутствует зараженный материал, а также в пробирках с нормальной сывороткой (6 и 7) кольца помутнения отсутствуют и видна лишь граница между соприкасающимися жидкостями. В пробирке с сывороткой и физиологическим раствором отмечается легкое помутнение, не распространяющееся и не усиливающееся со временем.
Асколи реакцию можно ставить по сокращенной схеме, обязательно сохранив пробы 1, 2, 5 и 6.
Для постановки прижизненного диагноза Асколи реакция не применяется.
Некоторые сибиреязвенноподобные микробы дают положительную Асколи реакцию, которую легко дифференцировать со специфической при постановке реакции с указанным контролем.
См. также Сибирская язва.
|
№ пробирки |
Содержимое пробирки |
|
|---|---|---|
|
1 |
Преципитирующая сыворотка |
+ экстракт из исследуемого материала |
|
2 |
Преципитирующая сыворотка |
+ экстракт из селезенки заведомо сибиреязвенного животного |
|
3 |
Преципитирующая сыворотка |
+ экстракт из агаровой культуры бацилл сибирской язвы |
|
4 |
Преципитирующая сыворотка |
+ экстракт из материала, взятого от здорового животного |
|
5 |
Преципитирующая сыворотка |
+ физиологический раствор NaCl |
|
6 |
Нормальная сыворотка |
+ экстракт из исследуемого материала |
|
7 |
Нормальная сыворотка |
+ экстракт из селезенки заведомо сибиреязвенного животного |
|
8 |
Нормальная сыворотка |
+ физиологический раствор NaCl |
Библиография: Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней, под ред. К. И. Матвеева, с. 515, М., 1973; A s с о 1 i A. Die* Thermoprä-zipitinreaktion, Wien — Lpz., 1922, Bibliogr.
Д. M. Гольдфарб.