АДЛЕРА МЕТОД
Описание
АДЛЕРА МЕТОД (A. Adler) — количественное определение стеркобилина в кале; основано на способности цинковой соли стеркобилина давать зеленую флуоресценцию. Предложен в 1922 г.
Техника определения
Из суточного количества кала берут 10 г и растирают в ступке с 20 мл петролейного эфира в течение 3—5 мин. для извлечения индола и скатола (также дающих флуоресценцию). Обработку кала эфиром производят до исчезновения в экстракте реакции флуоресценции с Zn (СН3СОО)2. К промытому эфиром калу добавляют 1 г уксуснокислого цинка (в порошке), 10 мл 96% спирта и 3 капли 1% спиртового раствора йода; тщательно перемешивают и фильтруют. Фильтрат разводят в 10 и 100 раз специальной жидкостью (20 г уксуснокислого цинка растворяют в 100 мл дистиллированной воды и приливают 100 мл спирта).
Пипеткой разливают убывающие количества исходного и разведенного (1 : 10 и 1 : 100) фильтрата в ряд пробирок и доливают каждую из них разводящей жидкостью до объема 2 мл (таблица); зеленая флуоресценция говорит о наличии стеркобилина. Отмечают, в какой из пробирок флуоресценция наименее интенсивна, и по таблице находят содержание в данном разведении стеркобилина в миллиграмм-процентах. Эту величину умножают на вес суточного количества кала и делят на 100 (для перевода миллиграмм-процентов в миллиграммы).
ПЕРЕСЧЕТ СОДЕРЖАНИЯ СТЕРКОБИЛИНА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ РАЗВЕДЕНИЯ ФИЛЬТРАТА
|
Исходный фильтрат |
Разведение 1:10 |
Разведение 1:100 | ||||||
|
фильтрат в мл |
разводящая жидкость в мл |
содержание стеркобилина в мг% |
фильтрат в мл |
разводящая жидкость в мл |
содержание стеркобилина в мг% |
фильтрат в мл |
разводящая жидкость в мл |
содержание стеркобилина в мг% |
|
2,00 |
_ |
0,17 |
0,80 |
1,20 |
4,25 |
0,80 |
1,20 |
42,5 |
|
1,50 |
0,50 |
0,22 |
0,66 |
1,34 |
5,10 |
0,66 |
1,34 |
51,0 |
|
1,00 |
1,00 |
0,34 |
0,57 |
1,43 |
5 ,95 |
0,57 |
1,43 |
59,5 |
|
0,80 |
1,20 |
0,43 |
0,50 |
1,50 |
6,80 |
0,50 |
1,50 |
68,0 |
|
0,50 |
1,50 |
0,68 |
0,40 |
1,60 |
8 ,50 |
0,40 |
1,60 |
85,0 |
|
0,40 |
1,60 |
0,85 |
0,30 |
1,70 |
11 ,00 |
0,30 |
1,70 |
110,0 |
|
0,30 |
1,70 |
1,10 |
0,26 |
1.74 |
12, 75 | |||
|
0,26 |
1.74 |
1,28 |
0,20 |
1,80 |
17,05 | |||
|
0,20 |
1,80 |
1,70 |
0,16 |
1,84 |
21,25 | |||
|
0,16 |
1,84 |
2,13 |
0,13 |
1,87 |
25,50 | |||
|
0,13 |
1,87 |
2,55 |
0,10 |
1,90 |
34,00 | |||
|
0,10 |
1,90 |
3,40 | ||||||
Пример: минимальная флуоресценция отмечена при разведении в 100 раз в пробирке с 0,3 мл фильтрата и 1,7 мл разводящей жидкости. В таблице это соответствует 110 мг% стеркобилина. Суточный вес кала 200 г. Таким образом, суточное выделение стеркобилина (110*200)/100 составляет 220 мг.
В норме суточное выделение стеркобилина с калом колеблется в пределах 200—600 мг.
Следует помнить, что зеленую флуоресценцию могут давать некоторые выделяющиеся с калом лекарственные средства (например, атебрин). Для разграничения истинной флуоресценции и медикаментозной в фильтрат добавляют разведенную соляную и серную кислоты (несколько капель). Флуоресценция, вызванная стеркобилином, исчезает, а медикаментозная остается.
Адлера метод отличается большой чувствительностью и находит широкое применение в клинике.
См. также Стеркобилин.
Библиография: Косяков К. С. Клиническая биохимия, с. 137, Л., 1967; Рапопорт С. М. Медицинская биохимия, пер. с нем., с. 432, М., 1966; Справочник по клиническим лабораторным методам исследования, под ред. Е. А. Кост, с. 329, М., 1968.
В. Я. Максимов.