АДЕНОВИРУСНЫЕ БОЛЕЗНИ

Источником инфекции служат больные люди и носители. К последним относятся выздоровевшие, у которых вирус сохраняется до 50 дней, а возможно, и более длительное время, а также здоровые. Нельзя не учитывать и частоту обнаружения аденовирусов, сходных с человеческими, у животных, в том числе домашних — коров, свиней, собак. Взаимосвязь аденовирусов человека и животных еще требует изучения и составляет одну из важнейших проблем эпидемиологии аденовирусных болезней.

Аденовирусы нередко определяют заболевания смешанной этиологии. Заслуживают внимания исследования Перейры и Кандеяса (М. S. Pereira, J. A. Candelas, 1971), показавшие, что у больных коклюшем (обследовано 136 детей) в 30% случаев выделены аденовирусы, а В. pertussis выявлена в 22%. Авторы заключают, что клинические симптомы коклюша могут вызываться не только В. pertussis, но и другими возбудителями, в частности аденовирусами.

Лабораторная диагностика

Аденовирусы вызывают заболевания, сходные по клинической картине с катарами верхних дыхательных путей, пневмонией, желудочно-кишечными расстройствами, конъюнктивитами. Поэтому методы лабораторной диагностики имеют решающее значение. Они делятся на вирусологические (выделение и идентификация вируса) и ретроспективные (серологические исследования, указывающие на этиологию перенесенного заболевания). Выделяют вирус из материала, полученного от больных (или вирусоносителей), путем взятия слизи тампоном со слизистой оболочки глотки и конъюнктивы. Можно исследовать глоточные смывы, для чего глотку тщательно полощут 20 мл буферного солевого раствора. Кал для исследования собирают в стерильную посуду; для взятия материала со слизистой оболочки прямой кишки используют также тампон.

К взятому материалу (кроме смыва) добавляют 5 мл солевого буферного раствора (путем погружения тампонов в заранее подготовленные пробирки) и антибиотики (пенициллин, стрептомицин и нистатин). После выдерживания в течение часа при комнатной температуре пробирки быстро охлаждают в смеси сухого льда и спирта, затеи сохраняют в рефрижераторе при температуре не выше —12°. Материал, взятый от больного, можно использовать и без замораживания при условии безотлагательной транспортировки в лабораторию и немедленного исследования.

До исследования материал необходимо гомогенизировать и центрифугировать 30 мин. при 3000 об/мин для осаждения тканевого детрита. Надосадочную жидкость используют для заражения тканевых культур и контрольного посева на бактериологические питательные среды.

Выделение аденовирусов производится на перевиваемых эпителиальных клетках HeLa, КВ, HEp-2 и других сходных линиях, полученных из опухолевых и нормальных тканей человека. Питательные среды для выращивания клеток применяются в соответствии с разработанными для этой цели прописями (см. Культуры тканей), однако при переносе культуры в поддерживающие растворы (перед заражением) не следует пользоваться сыворотками людей и животных, учитывая частое присутствие в них аденовирусных антител.

Зараженные культуры клеток подвергают инкубации при t° 37° в течение 14 дней, систематически просматривая пробирки и сравнивая их с контрольными, не зараженными культурами тех же клеток. При хорошем состоянии клеток в контрольных пробирках длительность инкубации может быть увеличена. Появление видимой дегенерации требует дальнейших пассажей на свежих клетках. При отсутствии дегенерации производят 2—4 «слепых» пассажа, направленных на накопление вируса. В процессе размножения аденовирусы остаются локализованными в клетках и, в отличие от кишечных вирусов, слабо поступают в жидкую фазу культуры, в питательный раствор. Поэтому для пассажей применяют взвесь клеток, осажденную в центрифуге и обработанную либо измельчением в аппарате типа блендера, либо повторным быстрым замораживанием и оттаиванием.

Дегенерация клеток указывает на положительный результат опыта. Выделенный вирус подлежит идентификации, которая проводится с помощью реакции связывания комплемента для определения группового антигена и реакции нейтрализации со специфическими сыворотками для типирования. Для реакции связывания комплемента применяют сыворотку предварительно иммунизированных морских свинок, для реакции нейтрализации — сыворотку иммунизированных кроликов. Для иммунизации животных-продуцентов сыворотки используют прототипные штаммы известных аденовирусов (см. выше).

При идентификации выделенного от сольных штамма необходимо определить его этиологическое значение, так как возможна латентная аденовирусная болезнь. Это достигается путем определения прироста антител в сыворотке крови, взятой у больного в начале заболевания и при выздоровлении. Увеличение титра антител не менее чем в 4 раза подтверждает правильность лабораторной диагностики. Наряду с серологическими опытами изучают биологические свойства вируса и проводят электронномикроскопическое исследование.

Ретроспективная диагностика основана на серологических реакциях, в которых определяются групповые комплементсвязывающие антитела к известному антигену. Для обнаружения типовых антител применяют реакцию нейтрализации и задержки гемагглютинации с прототипными штаммами аденовирусов.

Для диагностики аденовирусов в условиях эксперимента использован метод иммунной флуоресценции (цветная табл. рис. 4—7), при котором флуоресцирующими красителями обнаруживается специфический антиген (см. Иммунофлуоресценция).

Клиническая картина

Аденовирусные болезни, как правило, протекают в виде фаринго-конъюнктивальной лихорадки, катара верхних дыхательных путей, кишечной формы. Реже наблюдаются изолированные поражения глотки, конъюнктивы, мезентериальных лимфатических узлов.

Аденовирусный катар дыхательных путей — частая и наиболее легкая форма аденовирусных болезней. Она проявляется лихорадкой (продолжительностью в среднем 3—6 дней), умеренным или легким нарушением общего состояния больного и выраженными симптомами катара дыхательных путей: ринитом, трахеобронхитом. Изредка (в 3—4% случаев) возможно развитие астматического синдрома и ларингита. Частыми проявлениями болезни являются фарингит с выраженной зернистостью слизистой оболочки и припухание шейных и подчелюстных лимфатических узлов. Иногда отмечается рвота и учащенный жидкий стул.

Конъюнктивит — частое и характерное проявление болезни. Вначале он бывает обычно односторонним; второй глаз может поражаться позже. Различают катаральный, фолликулярный и пленчатый конъюнктивит. Последняя форма особенно типична для аденовирусных болезней. Конъюнктива век гиперемирована, зерниста и несколько набухшая; отмечается необильное выделение секрета. Через 1—3 дня на конъюнктиве век, иногда и переходных складок, появляются нежные белого или серовато-белого цвета пленчатые налеты. Частый симптом — отек век, иногда резко выражен, мягкий на ощупь. Поражение роговицы (аденовирусный кератоконъюнктивит) у детей раннего возраста встречается очень редко.

Фаринго-конъюнктивальная лихорадка — типичная форма аденовирусных болезней, проявляющаяся сочетанием катара дыхательных путей, фарингита и конъюнктивита.

Пневмония наблюдается преимущественно у детей первого года жизни. Изменения в легких связаны со специфическим действием аденовируса, но в возникновении пневмоний основную роль играет вторичная бактериальная флора. Поздние пневмонии обусловлены главным образом бактериальной инфекцией. Пневмония часто сочетается с катаром дыхательных путей или фаринго-конъюнктивальной лихорадкой. Она имеет интерстициальный, мелкоочаговый, крупноочаговый или сливной, полисегментарный характер и обычно проявляется выраженными симптомами — обильными разнокалиберными хрипами и отчетливым притуплением перкуторного звука. Отмечается одышка, цианоз, явления общей интоксикации. Могут наблюдаться судорожные припадки. Нередко возникают рвота и понос. Температура имеет неправильный характер. Болезнь, особенно у детей грудного возраста, имеет тенденцию к затяжному рецидивирующему течению и может заканчиваться смертью.

Кишечная форма (аденовирусная диарея) наблюдается преимущественно у детей первого года жизни и характеризуется умеренно учащенным жидким стулом, иногда с примесью слизи, расстройством аппетита; изредка наблюдается рвота. Температура повышена; весьма часты явления катара дыхательных путей.

Мезаденит — редкое проявление аденовирусных болезни; наблюдается либо на фоне других ее проявлений, либо как основной синдром. Характеризуется остро возникающими сильными, приступообразными болями в животе (преимущественно в его нижней части, нередко в правой подвздошной области), лихорадочным состоянием, тошнотой и иногда рвотой. Явления раздражения брюшины отсутствуют или выражены слабо. Нередко ошибочно диагностируется аппендицит, и больных подвергают операции. Описаны случаи осложнения мезаденита инвагинацией кишок.

У новорожденных отмечаются некоторые особенности течения аденовирусной болезни: субфебрильная температура, частота диспептических расстройств и пневмонии и, наоборот, редкость пленчатого конъюнктивита и увеличения лимфатических узлов. У недоношенных детей болезнь обычно протекает при нормальной или сниженной температуре.

Осложнения: отиты, синуситы, ангины и пневмонии — обусловливаются присоединением бактериальной инфекции. Аденовирусная болезнь может быть причиной обострения различных хронических, воспалительных процессов и образования хронического тонзиллита.

При диагностике аденовирусной болезни следует учитывать ее характерные особенности: катары дыхательных путей с выраженными экссудативными явлениями, умеренную интоксикацию, частое сочетание различных синдромов, последовательное возникновение которых сопровождается новыми подъемами температуры, частоту конъюнктивитов. В условиях эпидемической вспышки в детском коллективе клинический диагноз значительно облегчается.

Лечение

Лечение большинства больных проводится в домашних условиях. Госпитализации (в боксированные отделения) подлежат больные с тяжелой формой болезни, при наличии осложнений, сопутствующих заболеваний, а также по эпидемическим показаниям (например, больные из закрытых детских учреждений). В лихорадочном периоде необходим постельный режим. Питание должно быть полноценным и богатым витаминами; в лихорадочном периоде желательно преобладание молочно-углеводистой пищи.

Специфическая терапия находится в стадии изучения. Отзывы об эффективности применения интерферона противоречивы. Предложено применение дезоксирибонуклеазы — закапывание 0,05% раствора препарата через каждые 3 часа в течение 2—3 дней в нос (по 3—4 капли) и в конъюнктивальный мешок (по 1—2 капли). Рекомендовано также внутримышечное введение гамма-глобулина направленного действия, то есть содержащего специфические антитела в значительном титре. Антибиотики показаны лишь при пневмониях и других осложнениях бактериальной природы. Патогенетическая и симптоматическая терапия проводится в основном так же, как и при других респираторных вирусных инфекциях. При наличии гипертермии — антибиотики, ацетилсалициловая кислота, амидопирин внутрь или внутримышечно, пузырь со льдом на голову, холодное питье; тяжелобольным назначается капельное введение в прямую кишку охлажденного рингеровского раствора. С целью дезинтоксикации — внутривенное вливание плазмы, гипертонических растворов глюкозы. При выраженных катарах дыхательных путей применяют закапывание в нос растворов эфедрина, санорина, отхаркивающие; при астматическом синдроме — эфедрин, антигистаминные препараты, отвлекающая терапия (горчичники, горячие ножные ванны). При сердечно-сосудистой слабости назначают кордиамин, кофеин, эфедрин, оксигенотерапию. Лечение пневмония проводится по общим правилам, принятым в педиатрии (см. Пневмония, у детей).

Профилактика

Профилактика аденовирусной болезни разрабатывается в направлении получения вакцин трех типов: инактивированных, живых и ассоциированных. В связи с наличием множества типов аденовирусов необходимо введение в вакцину многих антигенов. Но так как наиболее часто аденовирусные болезни вызывают аденовирусы 3, 4 и 7 ссротипов, то именно они и являются компонентами аденовирусной инактивированной вакцины. Для инактивации аденовирусов используют формалин, а для усиления иммуногенности — дополнители в виде минерального масла [Миклджон (G. Meiklejohn), 1961]. Формалиновая и формол-масляная вакцины применяются подкожно и внутримышечно. Р. С. Дрейзин и В. М. Жданов (1962) считают, что вакцинация только против аденовирусов является нецелесообразной ввиду большого числа респираторных вирусных и бактериальных инфекций, столь частых у детей. Поэтому они высказываются в пользу вируснобактериальных вакцин из убитых антигенов, адсорбированных на гидроокиси алюминия.

Вакцинация живой пероральной вакциной предложена Хюбнером (Huebner). Тропизм аденовирусов к лимфоидной ткани и их способность не только длительно сохраняться в кишечнике, но и размножаться в нем позволяют предполагать эффективность такой вакцинации. Первые наблюдения Кауша (R. В. Couch) и др. (1962) показали, что штаммы аденовирусов 4 и 7 типов, введенные через рот в желатиновых капсулах взрослым добровольцам, вызвали у них продукцию антител, более выраженную, чем при введении инактивированной вакцины. Конкуренции двух антигенов в кишечнике не наблюдалось. Описан ряд опытов по заражению добровольцев аденовирусами через верхние дыхательные пути, в результате чего наблюдалось повышение специфических антител в крови у привитых. Аналогичный опыт был проведен А. А. Смородинцевым и А. А. Селивановым (1959). Авторы показали, что живые аденовирусы 4, 5 и 7 серотипов после 4—6 пассажей на ткани почек обезьян вызывают у добровольцев слабовыраженную лихорадочную реакцию без катаральных явлений с последующим развитием иммунитета. Применение живой аденовирусной вакцины еще не вышло за рамки ограниченного эксперимента.

В США профилактическая вакцинация против аденовирусной болезни неоднократно проводилась среди солдат первого года службы, которые, как показали статистические данные, наиболее восприимчивы к острым респираторным заболеваниям. Для этой цели использовалась вакцина, инактивированная при t° 37° формалином в разведении 1 : 4000 в дозе 1 мл подкожно или внутримышечно. Чаще всего вакцина состояла из трех типов аденовирусов: 3, 4 и 7. Кроме того, применялась живая аттенуированная энтеральная вакцина. В качестве антигена использовались и другие типы аденовирусов. В контролируемой группе отмечалось снижение заболеваний респираторными инфекциями, вызванными 4 и 7 типами аденовирусов.

Однако эти исследования, несмотря на положительные результаты, не получили практической реализации, в частности для вакцинации детей. Причина этого заключается в том, что аденовирусы в эксперименте обладают канцерогенными свойствами, стимулируя злокачественное перерождение клеток in vitro, и вызывают опухоли в эксперименте у молодых животных (подробнее — см. Аденовирусы). Поэтому более широко испытывалась энтеральная вакцина, приготовленная из аденовируса 4 типа, лишенного онкогенных свойств. По данным Чанока (R. М. Chanock, 1967), такая вакцина проверена на 23015 военнослужащих-новобранцах. Она оказалась безвредной, побочных реакций не вызвала, но, как и следовало ожидать, вакцина типоспецифична и обладает защитными свойствами лишь к аденовирусной болезни 4 типа. Общее снижение заболеваемости у привитых составило 59%.

Обычные меры профилактики: проветривание помещения, ультрафиолетовое облучение помещений при отсутствии в них людей, обмывание поверхностей раствором препаратов хлора, кипячение загрязненной одежды и белья.

См. также Респираторные вирусные болезни.

Таблицы

Таблица 1 ТИПЫ АДЕНОВИРУСОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ В СССР ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ (по Р. С. Дрейзин и В. М. Жданову. 1962)

Таблица 2

СООТНОШЕНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ГРУПП ВИРУСОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ПРИ ОБСЛЕДОВАНИИ БОЛЬНЫХ РЕСПИРАТОРНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ (по материалам И. В. Антоновой и Л. Я. Закстельской, 1972)

* Исследования проведены в разных районах СССР.

Библиография: Антонова И. В. и Закстельская Л. Я. Лабораторная диагностика гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций, в кн.: Обзор регионального центра но гриппу за I квартал 1972 г., под ред. В. М. Жданова и Л. Я. Закстельской, с. 16, М., 1972; Дрейзин Р. С. и Жданов В. М. Аденовирусные инфекции, М., 1962: Сигаева Л. А., Негина А. И. и Грачева К. Г. О роли аденовирусов в возникновении групповых заболеваний у детей, Журн. микр., энид. и иммун., № 11, с. 140, 1971; Смородин дев А. А. и Селиванов А. А. Результаты иммунизации волонтеров живой ослабленной аденовирусной вакциной типа IV, V и VII, Вопр. вирусол., № 6, с. 648, 1.959; Coucb R. В. а. о. Immunization with types 4 and 7 adenovirus by selective infection of the intestinal tract, Amer. Rev. rcsp. Dis., v. 88, № 3, pt 2, p. 394, 1963, bibliogr.; Meiklejohn G. a. Denver M. D. Adjuvant influenza adenovirus vaccine, J. Amer. med. Ass., v. 179, p. 594, 1962, bibliogr.; Pereira M. S. a. Сandeias J. A. N. The association of viruses with clinical pertussis, J. Hyg. (Lond.), v. 69f p. 399, 1971, bibliogr.

У детей — Респираторные вирусные и энтеровирусные инфекции у детей, под ред. С. Д. Носова и В. Д. Соболевой, с. 137, М., 1971; Ритова В. В. Острые респираторные вирусные инфекции у детей раннего возраста, М., 1969, библиогр.; Херсонская Р. Я. Клиника и лечение аденовирусных заболеваний, Киев, 1971, библиогр.

В. Д. Соловьев; С. Д. Носов (кл.).