РУСНЯКА МЕТОДЫ

РУСНЯКА МЕТОДЫ (глобулинов (см.) в сыворотке крови свидетельствует о состоянии белкового обмена в организме. Р. м. в клин, практике вытесняются новейшими количественными методами и их микромодификациями.

Определение соотношения альбуминов и глобулинов в сыворотке крови

Метод разработан И. Ру силком в 1923 г.

Принцип метода

Принцип метода: в нейтральной среде полунасыщенный р-р сернокислого аммония [(NH₄)₂SO₄] осаждает только глобулины сыворотки крови, а в кислой среде — полностью альбумины и глобулины; методом нефелометрии (см.) определяют соотношение фракций этих белков в сыворотке крови.

Ход определения

К 25 мл р-ра сернокислого аммония (1 часть насыщенного р-ра + 1 часть воды, pH 6,5—6,8) приливают 0,1 мл негемолизированной сыворотки крови, перемешивают; происходит осаждение глобулинов. Для совместного осаждения альбуминов и глобулинов к 50 мл подкисленного р-ра сернокислого аммония (1 часть насыщенного р-ра + 1 часть 0,2 н. р-ра соляной к-ты) приливают 0,1 мл сыворотки крови, перемешивают; оба р-ра нефелометрируют, находят величину соотношения

[альбумины + глобулины] / глобулины

и

альбумины / глобулины.

Если в исследуемой сыворотке крови количественно определена общая концентрация белка, то, исходя из найденного соотношения, можно вычислить концентрацию альбуминов и глобулинов.

Определение содержания хлоридов в крови

Метод разработан И. Русняком в 1921 г.

Принцип метода

Принцип метода: р-р азотнокислого серебра (AgNO₃), добавленный к крови в избыточном количестве, образует с хлором осадок хлористого серебра (AgCl); количество непрореагировавшего азотнокислого серебра определяют путем титрования р-ром роданистого аммония (NH₄SCN).

Ход определения

В две колбочки объемом 30—40 мл наливают 2,0 и 2,2 мл дистиллированной воды (опытная и холостая пробы). К опытной пробе приливают 0,2 мл крови, затем в обе колбы добавляют по 0,5 мл концентрированной азотной к-ты, не содержащей хлора и азотистой к-ты. и по 5,0 мл 0,01 н. р-ра азотнокислого серебра, нагревают, взбалтывая, на небольшом пламени горелки до кипения, снимают с огня, прибавляют по каплям насыщенный р-р перманганата калия до неисчезающего фиолетового окрашивания и вновь кипятят 5 мин. С целью восстановления избытка перманганата калия к горячему р-ру прибавляют небольшое количество глюкозы, не содержащей хлора, до его обесцвечивания. На дне колбы образуется хлопьевидный осадок хлористого серебра. После охлаждения к р-ру прибавляют небольшое количество железоаммиачных квасцов [Fe₂(NH₄)₂(SO₄)₄-24H₂O], не содержащих хлора, и титруют 0,01 н. р-ром роданистого аммония до появления розового окрашивания. Количество роданистого аммония, пошедшего на титрование, эквивалентно количеству азотнокислого серебра, не вступившего в реакцию. Т. к. общее количество взятого азотнокислого серебра известно, можно рассчитать количество серебра, вступившее в реакцию с хлором, и соответственно количество хлора.

Концентрация хлора в сыворотке крови в норме равна 360— 380 мг/100 мл.

См. также Хлор.

Библиография: Альтгаузен А. Я. Лабораторные клинические исследования, с. 225, М., 1948; Руководство по клиническим лабораторным исследованиям, под ред. Е. А. Кост и Л. Г. Смирновой, с. 243, М., 1964; Rusznyak I. Physikalisch-chemische Untersuchungen an Korperfltis-sigkeiten, I. Der Zustand des Chlors im Serum und Plasma, Biochem. Z., Bd 110, S. 60, 1920; Rusznyak Т., В a-rath J. u. K ii r t h у L. Untersuchungen uber die klinische Bedeuturig der Ei-weissfraktionen des Blutplasmas, Z. klin. Med., Bd 98, S. 337, 1924.

Л. М. Пименова.