РАДИОАЛЛЕРГОСОРБЕНТНЫЙ МЕТОД

РАДИОАЛЛЕРГОСОРБTЕНТНЫЙ МЕТОД [син.: радиоаллергосорбентный тест, RAST (англ. Radioallergosorbent test)] — количественный радиоиммунологический метод определения в крови человека IgE-анти-тел к разным видам аллергенов; метод используется при диагностике IgE-опосредованных атопических проявлений аллергии.

Р. м. является дополнительным диагностическим тестом и применяется в случае невозможности постановки кожных проб (см.) из-за вовлечения кожного покрова в патол, процесс (экзема, крапивница, атопический дерматит и др.), если нельзя прервать противоаллергическую терапию, при выявлении сниженной кожной реактивности (у детей раннего возраста, у пожилых людей), при повышенной чувствительности такой степени, когда на введение аллергена могут развиться системные реакции (при аллергии к пенициллину, яду перепончатокрылых и др.), при расхождении данных аллергологического анамнеза с данными кожных и провокационных проб (см.). Помимо использования в диагностических целях, Р. м. может быть применен для стандартизации диагностических и леч. форм аллергенов. Для этой цели используют возможность определения Р. м. способности находящегося в р-ре испытываемого аллергена тормозить присоединение IgE-антител к тому же аллергену, фиксированному на целлюлозной или какой-нибудь другой основе.

Разработка метода, осуществленная в 1967 г. группой шведских исследователей под руководством Юханссона (S.G.O. Johansson), стала возможной после открытия IgE (см. Миеломная болезнь).

Определение IgE-антител Р. м. производится в два этапа. Аллерген иммобилизуют на какой-либо твердой, напр, целлюлозной, основе (бумажном диске из фильтровальной или хроматографической бумаги). На такой диск наносят сыворотку (или плазму) крови, в к-рой предполагают присутствие IgE-антител, и инкубируют в течение 3 час. при комнатной температуре. Образовавшийся комплекс аллерген — IgE-антитело прочно связан с целлюлозной основой. Несвязавшиеся антитела и другие компоненты сывортки (плазмы) крови отмывают буферным р-ром. На втором этапе Р. м. к комплексу аллерген — IgE-антитело, фиксированному на бумажном диске, добавляют очищенные кроличьи анти-IgE-антитела, меченные ¹²⁵I. Систему оставляют на ночь при комнатной температуре, затем отмывают несвязавшиеся анти-IgE-антитела, бумажные диски с фиксированным на них комплексом аллерген — IgE-антитело — анти-IgE — антитело-¹²⁵I помещают в гамма-счетчик для учета связанной радиоактивности. Чем выше радиоактивность, тем больше IgE-антител к интересующему исследователя аллергену содержится в испытуемой сыворотке крови. Полученные результаты классифицируют по шкале: очень высокое содержание IgE-антител, высокое содержание, среднее, низкое и, наконец, такое содержание IgE-антител, при котором они не определяются радиоаллергосорбентным методом. Результаты определения можно выражать в процентах к общей радиоактивности, т. е. к радиоактивности пробы, содержащей только анти-IgE-антитела, меченные ¹²⁵I.

Для определения IgE-антител Р. м. с 16 аллергенами достаточно 1 мл сыворотки (или плазмы) крови. Сыворотку (или плазму) крови хранят при 4°, если IgE-антитела в ней определяют Р. м. в течение недели после взятия крови, или при —20°, если определение производят в более отдаленные сроки.

Для проведения Р. м. существуют стандартные наборы, состоящие из лиофилизированных анти-IgE-антител, меченных ¹²⁵I, реактивов для приготовления буферного р-ра, бумажных дисков с фиксированными на них аллергенами, дисков, на которых иммобилизован стандартный антиген (референс-дисков), лиофилизованных сывороток крови человека с известной концентрацией IgE-антител (референс-сывороток).

При диагностике лекарственной аллергии (см.) Р. м. используют только для определения IgE-антител к основным аллергенным детерминантам пенициллина (группа пенициллоила), т. к. носители аллергенных свойств большинства других лекарственных средств пока неизвестны.

Р. м. высокоспецифичен, и результаты его хорошо коррелируют с результатами реакции Прауснитца — Кюстнера (см. Прауснитца-Кюстнера реакция), реакции высвобождения гистамина (см.) из лейкоцитов, провокационных проб и кожных проб. Чувствительность Р. м. ниже чувствительности кожных проб, чем объясняется невысокое совпадение результатов этих методов. Однако по сравнению с кожными пробами Р. м. имеет ряд преимуществ; Р. м. полностью безвреден для больного; результаты метода являются количественными; на результаты не влияет прием противоаллергических лекарственных средств; аллерген стабилен при хранении; использование метода возможно на любой стадии заболевания. К недостаткам Р. м. относятся: ограниченный срок использования радиоизотопного материала; более низкая чувствительность и большая продолжительность реакции по сравнению с кожными пробами; ограниченное число аллергенов; Р. м., кроме IgE не выявляет других типов антител, также определяющих немедленные аллергические реакции (напр., IgG); для Р. м. необходимы гамма-счетчик и реактивы, что делает стоимость метода довольно высокой.

Как и другие методы, осуществляемые in vitro, Р. м. принципиально отличается от диагностических аллергологических проб на самом больном тем, что выявляет лишь антитела, а не состояние повышенной чувствительности к каким-либо веществам. Р.м. не может заменить диагностических аллергологических проб на больном.

При проведении специфической гипосенсибилизации (см.) содержание IgE-антител, определяемых Р. м., сначала повышается, а затем либо снижается до (или ниже) исходного уровня, либо остается повышенным. Повторные курсы гипосенсибилизации сопровождаются более заметным уменьшением содержания IgE-антител, однако четкой связи между клин, эффектом гипосенсибилизации и изменением содержания IgE-антител в сыворотке крови не обнаружено, в связи с чем Р. м. не может быть использован для оценки эффективности лечения.

Разработан метод, аналогичный Р. м., для определения противоаллергенных IgG-антител, к к-рым принадлежат так наз. блокирующие антитела. Очевидные преимущества перед Р. м. имеет иммуноферментный (иммуноэнзимный) метод определения аллергических антител, начинающий входить в практику аллергологических лабораторий.

Библиография: Адо А. Д. Общая аллергология, М., 1978; Гущин И. С. Немедленная аллергия клетки, М.,1976; Ali М. а. о. Assay of IgE antibodies against June and Timothy grasses by an immunoperoxi-dase technique, Clin. Allergy, v. 10, p. 203, 1980; Johansson S. G. O. a. Foucard T. IgE in immunity and diseases, в кн.: Allergy, principles and practice, ed. by E. Middleton a. o., v. 2, p. 551, St Louis, 1978; Thomas L. L. a. Lichtenstein L. M. Laboratory diagnosis of immediate hypersensitivity disorders, в кн.: Comprehensive immunol., ed. by R. A. Good a. S. B. Day, v. 6, p. 583, N. Y., 1979; Weltman J. K. a. o. A galactosidase immunosorbent test for human immunoglobulin E, J. Allergy, V. 58, p. 426, 1976.

И. С. Гущин.