КРИСТЕНСЕНА СРЕДЫ

Категория :

Описание

КРИСТЕНСЕНА СРЕДЫ (W. Christensen) — сложные агаризованные питательные среды, предназначенные для дифференциации энтеробактерий.

Цитратно-сульфидный агар Кристенсена

Состав: лимоннокислого натрия — S г, глюкозы — 0,2 г, дрожжевого экстракта — 0,5 г, цистеина солянокислого — 0,1 г, однозамещенного фосфорнокислого калия — 1 г, хлористого натрия — 5 г, тиосульфата натрия — 0,08 г, лимоннокислого аммонийного железа — 0,4 г, фенолового красного — 0,012 г, агара — 15 г, дистиллированной воды — 1000 мл. Конечный pH среды — 6,7.

Предварительно все соли растворяют в малых объемах воды, затем сливают вместе и добавляют агар. После набухания агара смесь кипятят до растворения агара, фильтруют и добавляют 0,4% р-р красителя (3 мл на 1 л среды). Среду разливают в пробирки и стерилизуют в течение 15 мин. при 1 атм. После стерилизации пробирки оставляют до застывания среды в наклонном положении так, чтобы образовался столбик и скошенная поверхность в соотношении 1:2. Лимоннокислое аммонийное железо и тиосульфат натрия в случае необходимости могут быть исключены.

Посев культуры производят на всю скошенную поверхность среды.

Выращивание ведется при t° 37° в течение 7 дней. При росте ряда патогенных бактерий (возбудителей брюшного тифа, паратифов, дизентерии, пищевых токсикоинфекций, а также Proteus) поверхность среды окрашивается в красный цвет, при росте кишечной палочки — в желтый цвет.

Мочевинная среда Кристенсена

Состав: пептона — 1 г, хлористого натрия — 5 г, глюкозы — 1 г, однозамещенного фосфорнокислого калия — 2 г, фенолового красного — 0,012 г, мочевины — 20 г, дистиллированной воды — 100 мл. Приготовленный путем последовательного растворения указанных ингредиентов концентрат мочевины доводится до pH=6,8 и стерилизуется путем фильтрования через фильтр Зейтца.

15 г агара растворяют в 900 мл дистиллированной воды, автоклавируют 15 мин. при 1 атм и охлаждают на водяной бане до t° 55°. Затем к охлажденному агару приливают 100 мл стерильного концентрата мочевины. Приготовленную т. о. среду разливают в пробирки и охлаждают (до застывания) в наклонном положении, чтобы образовались столбик и скошенная поверхность в соотношении 1:2.

Посев культуры производят газоном на скошенную часть среды. Выращивание ведут при t° 37° с учетом результатов через 2, 4 и 18 час. Пробирки со средой неизменившегося цвета необходимо оставлять на 4 сут. с ежедневным просмотром с целью выявления замедленной реакции, к-рую дают представители определенных групп бактерий, отличающихся от Proteus.

Бактерии, расщепляющие мочевину, подщелачивают среду, в результате чего она окрашивается в красный цвет.

См. также Питательные среды.


Библиография: Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, под ред. М. О. Биргера, М., 1973; Christensen W. Urea decomposition as means of differentiating proteus and paracolon cultures from each other and from Salmonella and Shigella types, J. Bact., y. 52, p. 461, 1946; Manual of clinical microbiology, ed. by E. H. Lan-nette a. o., p. 881, Washington, 1974.

Ю. К. Фомичев.