ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Категория :

Описание

ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ — методы изучения химических свойств тканей и выявления особенностей обмена веществ в тканевых структурах.

Рис. 1. Микропрепарат селезенки при длительной антигенной стимуляции: увеличение РНК в цитоплазме клеток селезенки (указано стрелками); реакция Браше; Х250).
Рис. 3. Микропрепарат соединительной ткани при ревматизме: интенсивная метахромазия (Мукоидное набухание) — указана стрелками (окраска толуидиновым синим при pH 2,7; X 112).
Рис. 3. Микропрепарат соединительной ткани при ревматизме: интенсивная метахромазия (Мукоидное набухание) — указана стрелками (окраска толуидиновым синим при pH 2,7; X 112).
Рис. 4. Микропрепарат печени (жировая дистрофия): жир в печеночных клетках (окраска Суданом III; X 110).

Г. м. и. делят на разрушающие и неразрушающие. Неразрушающие методы требуют соблюдения определенных физ. констант (кристаллографические характеристики, электромагнитные лучи, люминесценция и т. п.) и хим. показателей (in vivo, после холодной промывки, фиксации и реакции). К разрушающим методам относят растворение, распыление, микровозгонку, гистоспектрографию, экстракцию с энзимами и другими реагентами, гистопиролизис и др. Кроме того, существуют так наз. методы разделения, к к-рым относят микрозонд, микротомные срезы, экстракцию с растворителями, дифференциальное центрифугирование с использованием микрогравиметрической, калориметрической, полярографической, радиометрической и микробиол, техники. Важнейшим свойством большинства Г. м. и. является возможность дифференцировать тканевые (клеточные) хим. компоненты, основываясь на их различном сродстве к красящим веществам и взаимодействии красителей или хим. реагентов со специфическими группировками белков, полисахаридов, жиров, ферментов и т. д. (цветн. рис. 1—4).

Для проведения гистохим, исследований необходима строгая прижизненная локализация искомого хим. соединения, что возможно лишь при сохранении структуры тканей и клеток в состоянии, близком к тому, к-рое имеется в живом организме. Это достигается получением срезов свежезамороженных тканей с помощью ножа глубокого охлаждения и криостата. Каждый метод должен быть специфичным, т. е. избирательно выявлять группу определенный веществ или определенное хим. вещество, а также высокочувствительным.

Результаты гистохим, исследования могут оцениваться качественно и количественно. Качественная оценка реакции основывается на выявлении характерной окраски искомого вещества (гистохим, реакции), типичного распределения ферментных гранул (гистоферментохим. реакции), специфического свечения (иммуногистохим. реакции), для чего пользуются световым или люминесцентным микроскопами. Возможно сочетание гисто(цито)хим. метода с электронно-микроскопическим (см. авторадиографии (см.).

Г. м. и. применяют для определения различных тканевых (клеточных) хим. компонентов, напр, белков, витаминов, гормонов, пигментов и др.

Для гистохим, определения белков применяют ряд методов, выявляющих аминокислоты, входящие в их состав (см. Рибонуклеиновые кислоты, гистохимические методы определения в тканях).

При гистохим, выявлении специфических белков — ферментов, которые играют роль биол, катализаторов, учитывают их термостабильность (оптимум действия 37—40°), высокую чувствительность к изменению среды, выраженную специфичность действия (см. Липазы, гистохимические методы определения в тканях; Эстеразы, гистохимические методы определения в тканях).

Большую группу ферментов, катализирующих окислительно-восстановительные процессы, составляют дегидрогеназы (см. Липиды, гистохимические методы определения в тканях) основано на растворении инертных бис-азосоединений или других красителей в самих жирах.

Для гистохим, выявления липопротеидов применяют те же методы, что и для определения белков (см. Пигменты, гистохимические методы определения в тканях).

Г. м. и. находят широкое применение в эмбриологии и гистологии, цитологии, патологической анатомии, экспериментальной и клин, патологии для решения как теоретических, так и практических задач.

С помощью разнообразных методов современной гистохимии можно судить не только об особенностях хим. реакций различных тканевых структур, но и определять характер и темп обмена в тканях и клетках, а главное специфику функций, специализированных структур, что позволяет изучать самые ранние (функциональные) проявления многих заболеваний.

См. также Иммуноморфология.


Библиография Берстон М. Гистохимия ферментов, пер. с англ., М., 1965; Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия, пер. с англ., М., 1969; П и р с Э. Гистохимия, пер. с англ., М., 1962; Принципы и методы гисто-цитохимического анализа в патологии, под ред. А. П. Авцына и др., Л., 1971; Akzessori-sche Methoden in der Histochemie, hrsg. v. G. Geyer u. H. Luppa, Jena, 1975; Gewebe-vorbehandlung und Fixation in der Histo-chemie-Probleme biologischer Farbstoffe, hrsg. y. D. Wittekind, Jena, 1973; K i!s-z e 1 y G. u. P o s a 1 a k y Z. Mikrotech-nische und histochemische Untersuchungs-methoden, Budapest, 1964.

B. B. Серов, А. Г. Уфимцева.