ГРЕМБЕРА МЕТОД

ГРЕМБЕРА МЕТОД (L. Grimbert, франц. химик, 1860—1931)— качественный метод обнаружения билирубина. Применяется в основном для исследования мочи с целью дифференциальной диагностики желтух (см.), а также для обнаружения желчных пигментов в желудочном соке. Предложен Грембером в 1905 г.

Метод основан на окислении билирубина в биливердин (пигмент зеленого цвета) и другие желчные пигменты различной окраски. В качестве окислителя используется 5% спиртовой р-р соляной к-ты, в качестве адсорбента билирубина — хлористый барий.

Обнаружение желчных пигментов в моче

К 10 мл мочи в центрифужной пробирке добавляют 5 мл 10% р-ра хлористого бария, взбалтывают, затем центрифугируют. Осадок, который состоит из фосфата, сульфата и, возможно, билирубината бария, промывают 10 мл дист, воды, снова центрифугируют, удаляют промывную воду и приливают к осадку 5 мл 5% (по объему) спиртового р-ра соляной к-ты (5 мл конц. соляной к-ты смешивают с 95 мл спирта 90%), растворяющего осадок. Пробирку помещают в кипящую водяную баню на 1 мин.

При отсутствии билирубина жидкость остается бесцветной. При наличии желчных пигментов жидкость окрашивается в интенсивный зеленый, синий или красный цвет (характер окраски связан с окислением билирубина в биливердин, билицианин или билипурпурин).

Если жидкость приобретает бурую окраску, это может быть связано с неполным окислением желчных пигментов. В этом случае в пробирку добавляют 2 капли 10% перекиси водорода и снова помещают на 1 мин. в кипящую водяную баню. В присутствии билирубина появляется зеленая, синяя или красная окраска. Если, несмотря на добавление перекиси водорода, цвет жидкости остается устойчивым, это свидетельствует о наличии бурых пигментов, которые образуются за счет разрушения желчных пигментов в длительное время стоящей моче.

Реакция отличается высокой чувствительностью. С помощью этого метода можно обнаружить следы желчных пигментов (при условии достаточного количества мочи для исследования — 100—500 мл). В норме у человека билирубин в моче не обнаруживается. При гепатитах различной этиологии и циррозах печени отмечают резкое увеличение выведения с мочой билирубина и других желчных пигментов.

Обнаружение желчных пигментов в желудочном соке

Для исследования берут 5 мл желудочного сока, нейтрализуют 2% р-ром бикарбоната натрия (индикатор — фенолфталеин, 1%), затем добавляют одну каплю смеси, приготовленной из равных частей 10% сульфата натрия и 10% однозамещенного фосфата натрия, после чего определение продолжают так же, как и при определении билирубина в моче.

Библиография: Джорджeску П. и Пэунeску Б. Биохимические методы диагноза и исследования, пер. с румын., с. 242, 287, Бухарест, 1963;. Grimbert L. Recherche des pigments biliaires dans Гй- rine, J. Pharm. Ghim. (Paris), t. 22, p. 487, 1905; Guiart J. et Grimbert L. Pr6cis de diagnostic chimique, micro-scopique et parasitologique, £ 1’usage des midecins, P., 1922.

Л. М. Пименова.