ВАН-СЛАЙКА МЕТОДЫ
Описание
ВАН-СЛАЙКА МЕТОДЫ (D. D. Van Slyke), амер. биохимик, род. в 1883 г.) — методы количественного определения аминного азота, газообразного кислорода и углекислого газа в крови.
В основе методов лежит вытеснение газов хим. и физ. (вакуум) способами, поглощение выделившихся газов соответствующими поглотителями, измерение давления до и после поглощения анализируемого газа. Определение проводят в аппарате Ван-Слайка, позволяющем измерять давление газа при постоянном объеме. Вытеснение кислорода из крови производят феррицианидом, а углекислого газа — молочной к-той. При определении кислорода и углекислого газа в одной порции крови готовят общий реактив (0,9 г феррицианида, 0,3 г сапонина, 7 мл 1 н. раствора молочной к-ты, 15 капель октилового спирта доводят дистиллированной водой до объема 100 мл). После вытеснения всех газов из крови и определения их общего давления производят поглощение углекислого газа щелочью и определяют давление оставшихся газов. Затем проводят поглощение кислорода щелочным раствором гидросульфита или пирогаллола и вновь измеряют давление. По разнице давлений до и после поглощения исследуемого газа рассчитывают его содержание в крови. Разницу давлений умножают на соответствующий фактор, величину к-рого обычно выражают объемом газа (в см3) в 100 мл крови, в условиях опыта смещающим уровень ртути в манометре прибора на 1 мм. Метод количественного определения газов крови используют для построения кривых связывания кровью кислорода и углекислого газа, для определения степени насыщения крови кислородом, кислородной емкости крови и т. п.
Определение аминного азота с помощью В.-С. м. основано на расщеплении продуктов диазотирования аминогрупп веществ, входящих в состав крови, с выделением газообразного азота
RNH2 + O = N-OH → ROH + N2 + H2O.
Образующийся при этом азот освобождается от окислов азота, после чего измеряют его объем. Эту величину делят пополам, т. к. только половина азота образовалась в результате разложения свободных аминогрупп. Определение аминного азота проводят в специальном приборе, состоящем из сосуда, в к-ром осуществляется взаимодействие аминосоединений с азотистой к-той, сосуда с поглотителем окислов азота и газовой бюретки для измерения объема выделившегося азота. При определениях вместо неустойчивой азотистой к-ты используют свежеприготовленный раствор нитрита натрия. При последующем добавлении в реакционный сосуд раствора уксусной к-ты образуется азотистая к-та, реагирующая с аминосоединениями. Для проведения поглощения окислов азота, образующихся при разложении азотистой к-ты, применяют щелочной раствор перманганата калия. Зная объем выделившегося газа и учитывая, что при нормальных условиях (0° и 760 мм рт. ст.) 1 моль газа занимает объем 22,4 л, можно рассчитать количество аминного азота в исследуемом растворе. Для этого полученный объем (после поправки на объем газа, выделившегося из реактивов) делят пополам и находят объем газа, образовавшегося из аминогрупп. После приведения полученного объема газа к нормальным условиям и умножения на 1,25 мг (масса 1 мл сухого азота) получают количество азота аминогрупп в исследуемой пробе.
Ван-Слайком предложен также метод определения щелочного резерва крови, т. е. количество углекислого газа при t° 0° и давлении 760 мм рт. ст., к-рое может быть связано 100 мл плазмы крови в атмосфере, содержащей 5,5% CO2 (соответствует парциальному давлению углекислого газа в альвеолярном воздухе или артериальной крови).
Для этого берут свежую кровь, в к-рую добавляют щавелевокислый калий (для предупреждения свертывания), центрифугируют для отделения плазмы. Определенное количество плазмы помещают в специальный сосуд для насыщения ее альвеолярным воздухом (рис.). При этом плазма связывает столько углекислого газа, сколько она обычно содержит в артериальной крови. Затем плазму, насыщенную углекислым газом, вносят в аппарат Ван-Слайка и определяют количество углекислого газа, как описано выше.
В норме плазма крови содержит в растворенном виде от 52 до 65 мл CO2 газа на 100 мл плазмы. Уменьшение щелочного резерва является признаком алкалоз (см.).
Определение количества газов крови можно вести с помощью газоанализаторов.
Библиография: Балаховский С. Д. и Балаховский И. С. Методы химического анализа крови, М., 1953; М e ш-кова Н. П. и Северин С.Е. Практикум по биохимии животных, М., 1950, библиогр.; Руководство по клиническим лабораторным исследованиям, пол ред. Е. А. Кост и Л. Г. Смирновой, с. 266», М., 1964.
Г. А. Кочетов.