ШЕНХЕЙМЕРА МЕТОД

ШЁНХЕЙМЕРА МЕТОД (R. Schoenheimer, американский врач родился в 1898 году) — метод определения в сыворотке крови свободного и этерифицированного холестерина. Метод используется в качестве дополнительного диагностического теста при диагностике атеросклероза (см.), гипотиреоза (см.), нефротического синдрома (см.), заболеваний печени, различных нарушений жирового обмена (см.) и др.

Принцип метода

Холестерин экстрагируют смесью спирта с эфиром: в одной части экстракта определяют общее содержание холестерина (общий холестерин), в другой— содержание сложного эфира холестерина (этерифицированный холестерин) после осаждения свободного холестерина дигитонином, затем рассчитывают содержание свободного холестерина (разность между содержанием общего и этерифицированно-го холестерина).

Ход определения

В мерную колбу на 25 мл наливают 15 мл смеси спирта с эфиром (3:1), встряхивая, добавляют по каплям 1 мл сыворотки крови. Ставят на 1 минуту в кипящую водяную баню и хорошо перемешивают. Охлаждают, доводят до метки смесью спирта и эфира, фильтруют. Фильтрат собирают в бутылку, которую плотно закупоривают. Определение общего холестерина: 5 мл фильтрата, соответствующих 0,2 мл сыворотки крови, нагревают в пробирке на водяной бане до полного выпаривания и образования сухого остатка. Охлаждают и при сильном встряхивании добавляют небольшими порциями 10 мл хлороформа. Затем фильтруют и к 5 мл фильтрата, соответствующим 0,1 мл сыворотки крови, добавляют 2 мл уксусного ангидрида и 5 капель концентрированной серной кислоты, слегка встряхивают, закупоривают пробкой и оставляют стоять в темном месте точно 30 минут, в течение которых развивающаяся зеленая окраска достигает наибольшей интенсивности. Колориметрируют (см. Колориметрия) при 720 нм (красный светофильтр) в кювете с толщиной слоя 5 мм. Расчет содержания холестерина производят по калибровочному графику, построенному с использованием стандартных растворов холестерина.

Определение этерифицированного холестерина: 10 мл фильтрата, соответствующих 0,4 мл сыворотки крови, нагревают на водяной бане до исчезновения запаха эфира, добавляют 1 мл 1% раствора дигитонина, слегка встряхивают и продолжают выпаривать до получения сухого остатка. Охлаждают и добавляют небольшими порциями 10 мл хлороформа, встряхивая при каждом добавлении, фильтруют. Из фильтрата берут 5 мл, соответствующих 0,2 мл сыворотки крови, после чего определяют концентрацию сложного эфира холестерина так же, как описано выше при определении концентрации общего холестерина.

Концентрация свободного холестерина составляет разность между концентрацией общего холестерина и концентрацией этерифицированного холестерина.

Нормальные величины содержания этерифицированного холестерина в сыворотке крови, определенные с помощью Шенхеймера метода, составляют 90— 135 мг/100 мл, свободного холестерина — 40—70 мг/100 мл.

Библиогр.: Джорджеску П. и Пэунеску Е. Биохимические методы диагноза и исследования, пер. с румын., с. 168, Бухарест, 1963; Schoenhei-mer R. a. Sperry W. M. Micromethod for determination of free and combined cholesterol, J. biol. Chem., v. 106, p. 745, 1934.

Л. М. Пименова.