КЛАРКА СРЕДА

КЛАРКА СРЕДА (W. M. Clark, амер. химик, род. в 1884 г.) — дифференциально-диагностическая питательная среда для определения у бактерий интенсивности кислотообразования из глюкозы (реакция с метиловым красным) и образования ацетилметилкарбинола (реакция Фогеса — Проскауэра). Применяется для идентификации энтеробактерий, в основном эшерихий, выделенных при санитарно-бактериол. исследовании воды, молока, пищевых продуктов.

Для приготовления К. с. в ступке смешивают 5 г пептона, 5 г глюкозы, 5 г двухосновного фосфорнокислого калия (K₂HPO₄). Смесь растворяют в 800 мл дистиллированной воды и в течение 20 мин. подогревают при помешивании на водяной бане. Горячий р-р фильтруют через полотняный или бумажный фильтр, охлаждают до t 20°. Доливая дистиллированную воду, доводят объем до 1000 мл, разливают в пробирки по 5 мл и проводят дробную стерилизацию в течение 3 дней подряд. Исследуемую культуру засевают в К. с.

Для постановки реакции с метиловым красным к 5 мл четырехсуточной культуры, выращенной на К. с., добавляют 5 капель 0,04% р-ра метилового красного. При сильном кислотообразовании (pH< 5,0) появляется красное окрашивание — реакция обозначается Mr+; при слабом кислотообразовании (pH > 5,0) — желтое окрашивание (Mr-). Можно пользоваться спиртовыми индикаторами, которые могут сохраняться неопределенно долгое время. Однако лучше употреблять водные р-ры индикаторов, как более чувствительные. Сохраняют эти р-ры на холоду в склянках с притертыми пробками.

Для постановки реакции Фогеса — Проскауэра к 5 мл пятидневной культуры на К. с. добавляют 1 мл 10% водного р-ра едкого кали и ставят в термостат при t° 37°. Т. к. окраска появляется постепенно, реакция читается через 18—24 часа. При образовании ацетилметилкарбинола наблюдается розовая окраска с желтой флоккуляцией, характерная для спиртового р-ра эозина (положительная реакция). В случае отрицательного результата окраска не появляется, среда остается бесцветной. Реакция дает положительный результат у бактерий, сбраживающих глюкозу. Реакция получается четче в культурах тех бактерий, которые дают отрицательную реакцию с метиловым красным, т. е. при pH > 5,0. См. также Фогеса-Проскауэра реакция.

Библиография: Козлов Ю. А. Питательные среды в медицинской микробиологии, М., 1950, библиогр.; Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, под ред. М. О. Биргера, с. 60, М., 1973.

И. М. Гончаренко.