ИСАЕВА-ПФЕЙФФЕРА ФЕНОМЕН

ИСАЕВА-ПФЕЙФФЕРА ФЕНОМЕН (В. И. Исаев, отечественный микробиолог, 1854—1911; R. Pfeiffer, нем. бактериолог, 1858—1945) — растворение холерных вибрионов (бактериолиз) в организме животного под действием специфической иммунной сыворотки. И. — П. ф. был открыт в 1894 г. В. И. Исаевым и Р. Пфейффером в берлинском ин-те инфекционных болезней.

Для успешного воспроизведения И.—П. ф. необходимо соблюдать определенную дозировку материала и использовать достаточно вирулентную культуру холерных вибрионов. Техника постановки реакции: морскую свинку весом 200—300 г иммунизируют подкожно взвесью холерных вибрионов, убитых прогреванием при t° 60°. Через 8—10 дней после иммунизации в брюшную полость животного вводят 2 мг вирулентной культуры холерных вибрионов. Одновременно контрольной (неиммунизированной) морской свинке внутрибрюшинно вводят 0,05—0,1 мг той же культуры вибрионов. Через каждые 10 мин. из брюшной полости свинок шприцем или капилляром извлекают пробы экссудата. Во время этой процедуры животных следует держать в положении животом вниз и делать прокол брюшины по средней линии. Экссудат изучают под микроскопом в висячей капле или в окрашенных мазках. В брюшинной полости иммунизированной морской свинки холерные вибрионы быстро теряют свою подвижность, набухают, приобретая вначале овальную форму, а затем форму шаров или зерен, агглютинированных в кучки. В последующих препаратах зерна плохо окрашиваются и, постепенно уменьшаясь в размерах, полностью растворяются. Животное остается здоровым.

В брюшинной полости контрольной свинки холерные вибрионы сохраняют свою форму, активно двигаются и размножаются; в результате через несколько часов животное погибает.

Воспроизведение И.—П. ф. возможно также при внутрибрюшинном введении неиммунизированной морской свинке смеси вирулентных холерных вибрионов в определенных соотношениях со специфической иммунной сывороткой. Дозы бактерий и сыворотки определяются в предварительных опытах. В качестве контроля свежей морской свинке вводят вирулентную культуру бактерий в смеси с нормальной сывороткой, полученной от того же вида животного, что и иммунная. Извлечение экссудата и наблюдение за судьбой холерных вибрионов проводят так же, как описано выше.

В 1895 г. И. И. Мечников продемонстрировал феномен в опытах in vitro. К смеси холерных вибрионов со специфической иммунной сывороткой добавляют несколько капель брюшного экссудата непривитой морской свинки, содержащего лейкоциты. В висячей капле обнаруживается зернистое перерождение вибрионов с последующим их растворением. В том же году Ж. Борде значительно расширил эти исследования и установил необходимость участия комплемента (см.) в воспроизведении феномена растворения бактерий in vitro. В этих опытах две капли взвеси вирулентной культуры холерных вибрионов вводят в стерильные пробирки с1 мл специфической иммунной сыворотки, предварительно разведенной в 10 раз и инактивированной прогреванием при t° 56° в течение 30 мин. После добавления 2 капель свежего комплемента смесь на 2 часа помещают в термостат (при t° 37°). По истечении указанного срока в висячей капле или в окрашенных препаратах (мазках) наблюдался лизис вибрионов. Контролем при данной постановке опыта является смесь бактерий, нормальной инактивированной (в течение 30 мин. при t° 56°) сыворотки и комплемента, взятых в тех же соотношениях и находящихся в таких же условиях. Растворения холерных вибрионов в контроле не наблюдается. Ж. Борде предложил с помощью растворения бактерий in vitro определять степень бактериолитической активности иммунных сывороток. Для этого в стерильных пробирках готовят смесь 0,1 мл бактериальной культуры, 0,1 мл свежей сыворотки морской свинки (комплемент) и специфической иммунной сыворотки в различных разведениях. Пробирки встряхивают и помещают в термостат. Спустя 2—3 часа из каждой пробирки засевают одинаковое количество смеси на чашки с питательной средой, которые помещают в термостат (при t° 37°). Через 24 часа сопоставляют количество сыворотки и микробов каждой смеси с количеством выросших колоний. Данные всего ряда представляют количественную оценку бактериолитической активности испытуемой сыворотки.

Помимо вибрионов холеры, некоторые исследователи наблюдали лизис и других микробов: синегнойной палочки, пневмококков, стрептококков, палочек брюшного тифа, паратифа Б, туберкулеза, спирохет Обермейера и др.

Хотя И.— П. ф. может быть получен с возбудителями различных инфекционных заболеваний, воспроизведение его как реакции иммунитета в целях диагностики не получило широкого распространения. Это прежде всего объясняется сложностью опыта, тем более что для идентификации возбудителя существуют более простые реакции (агглютинации, преципитации, связывания комплемента и др.)* Однако применение И.—П. ф. возможно в тех случаях азиатской холеры, когда свежевыделенная культура вибрионов не обладает выраженной агглютинабельностью. В 1971 г. 3. В. Ермольева и Е. А. Ведьмина предложили реакцию определения вибриолитических (вибриоцидных) антител, к-рая прочно вошла в систему тестов для микробиол, диагностики холеры.

См. также Бактериолиз.

Библиография: Eрмольева З. В. и Ведьмина Е. А. Микробиологическая диагностика холеры, с. 25, М., 1971; Исаев В. И. Об иммунитете против холеры, Мед. прибавл. к мор. сб., № 4, с. 229, Кя 5, с. 293, 1894; Pfeiffer R. u. Issaeff V. t)ber die specifische Bedeutung der Choleraimmunitat, Z. Hyg. In-fektKr., Bd 17, S. 335, 1894.

В. А. Зуев.