ИМПРЕГНАЦИЯ
Описание
ИМПРЕГНАЦИЯ в гистологических методах исследования (позднелат. impraegnatio наполнение) — специальный метод выявления структур клеток и тканей, основанный на различной их способности удерживать или восстанавливать соли тяжелых металлов (напр., серебра, свинца, осмия, золота), растворами которых были пропитаны объекты микроскопирования, в связи с чем определенные участки их оказываются окрашенными в черный, бурый или другой цвет.
Наиболее важным этапом И. является восстановление металлической соли, к-рое чаще обусловливается редуцирующим (восстанавливающим) действием некоторых веществ, содержащихся в определенных компонентах тканей (аскорбиновая к-та, адреналин, креатин, глютатион, некоторые пигменты и пр.). В ряде случаев объект обрабатывают редуцирующими реактивами (формалин, пирогалловая к-та и т. п.); иногда в качестве редуцирующих агентов при И. используют солнечный свет или ультрафиолетовое облучение от искусственных источников, подкис ление, нагревание и т. д.
В процессе И. большое значение имеют размеры межмицеллярных пространств тканевых элементов, электростатические свойства микроскопических структур, размер образующихся частиц восстановленного металла и т. п. Поэтому успех И. в значительной степени определяется способом фиксации, pH применяемых р-ров, чистотой используемых реактивов и другими факторами. Меняя условия П., можно достичь избирательного выявления тех или иных тканевых элементов в зависимости от задач исследования.
Более глубоко изучена И. серебром. Успех серебрения во многом зависит от соответствующей микроскопической и субмикроскопической плотности тканевых элементов и невысокого содержания в них защитных коллоидов (см. Серебрения методы).
И. солями серебра используют для выявления нервных клеток, нейроглиальных элементов, периферических нервных волокон и их окончаний (см. Бильшовского-Грос-Лаврентьева метод), ретикулярной стромы органов, межклеточного вещества эпителия и гладкой мускулатуры, бледных трепонем и др.
В. В. Куприянов (1958) применил И. азотнокислым серебром соединительнотканных оболочек для исследования их кровеносных и лимф, сосудов. На препаратах становятся видимыми многие детали строения сосудистой стенки, включая особенности клеточных элементов. В основе этой модификации лежит методика, предложенная Е. И. Рассказовой (1954) для И. нервных элементов.
С целью улучшения качества препаратов срезы после И. серебром нередко тонируют солями золота (см. Золочения методы). Соли золота можно заменить насыщенным р-ром сероводорода в дистиллированной воде или 25% р-ром сернистого натрия. Хлорное и хлористое золото восстанавливается в жирах и богатых липидами, особенно миелином, участках тканей, окрашивая их в фиолетовый цвет. Из способов И. солями золота сохранили значение метод выявления нейроглии по Рамон-и-Кахалю (1926) в различных модификациях, а также ряд методов И. миофибрилл, нейрофибрилл и нервных окончаний.
И. осмием (чаще четырехокисью осмия) служит преимущественно для выявления жиров и липоидных веществ (окрашиваются в оливковочерные или коричневые тона). И. осмием понижает растворимость жиров в абсолютном спирте, хлороформе, эфирных маслах и др., вследствие чего этот метод обладает преимуществом, особенно при изучении миелиновых нервных волокон. И. осмием применяют также для выявления пластинчатого комплекса (комплекса Гольджи) в клетках, а также для фиксации клеток с целью дальнейшей электронной микроскопии (см.).
См. также Гистологические методы исследования.
Библиография: Морфологические основы микроциркуляции, под ред. В. В. Куприянова, с. 20, М., 1965; Меркулов Г. А. Курс патологогистологической техники, с. 181, Л., 1969, библиогр.; P о м e й с Б. Микроскопическая техника, пер. с нем., М., 1954, библиогр.; P о с к и н Г. И. и Левинсон Б. JI. Микроскопическая техника, с. 211, М., 1957.
Я. Е. Хесин.