БИЛЬШОВСКОГО-ГРОС-ЛАВРЕНТЬЕВА МЕТОД

БИЛЬШОВСКОГО-ГРОС-ЛАВРЕНТЬЕВА МЕТОД — метод фиксации и импрегнации различных структур периферической нервной системы. В основе метода лежит процесс серебрения элементов нервной ткани азотнокислым серебром (см. Серебрения методы). Предложен Бильшовским (М. Bielschowsky) в 1904 г. для выявления нейрофибрилл в ц. н. с. Затем появились модификации для выявления структур периферической нервной системы.

В 1918 г. Грос (J. Gros) рекомендовала производить импрегнацию замороженных срезов, контролируя процесс серебрения под микроскопом.

Советский гистолог Б.М. Лаврентьев в 1929 г. предложил новый состав фиксирующей жидкости, улучшающий процесс импрегнации.

Бильшовского-грос-лаврентьева метод состоит в следующем. Кусочки тканей и органов фиксируют в жидкости АФА, состоящей из равных частей 96% спирта, нейтрального формалина и насыщенного раствора мышьяковистой к-ты в течение 1 часа. Затем их без промывки переносят в 20% нейтральный формалин, где они могут храниться от нескольких дней до нескольких месяцев. После окончания фиксации кусочки споласкивают в дистиллированной воде и режут на замораживающем микротоме. Срезы переносят в 20% раствор азотнокислого серебра. Время пребывания срезов в серебре устанавливают опытным путем, для чего продолжают процедуру импрегнации на отдельных срезах. Затем срезы быстро проводят через 4—5 ванночек, наполненных 20% формалином, приготовленным на водопроводной воде, и помещают в раствор аммиачного серебра. Небольшой объем 20% раствора азотнокислого серебра титруют в часовом стекле каплями 25% раствора аммиака, пока не исчезнет осадок. В этом растворе срезы импрегнируются под контролем микроскопа, по окончании импрегнации их помещают на 10—15 мин. в аммиачную воду, а затем на несколько часов — в дистиллированную для промывки. Импрегнированные срезы рекомендуется золотить раствором хлорного золота и подкрашивать. Затем следует обезвоживание и заключение в канадский бальзам. Импрегнированные нервные структуры принимают золотисто-черные оттенки разной интенсивности. При золочении становятся серо-черными, при подкраске гематоксилином — лиловатыми. Наряду с импрегнацией нервных структур можно добиться умеренной импрегнации ядер тканевых клеток, аргирофильных волокон, миофибрилл.

См. также Гистологические методы исследования.

Библиография: Лаврентьев Б. И. Методика окраски нервных элементов по Бильшовскому в модификации Гросс, в кн.: Морфол, автономной нервн. системы, под ред. Б. И. Лаврентьева, с. 96, М., 1946; Роскин Г. И. и Левинсон Л. Б. Микроскопическая техника, с. 355, М., 1957; LawrentJewB. I. Experimen-tell-morphologische Studien liber den feine-ren Bau des autonomen Nervensystems, Z. mikr.-anat. Forsch., Bd 18, S. 233, 1929, Bibliogr.

E. К. Плечнова.