БАЛАХОВСКОГО МЕТОД

Категория :

Описание

БАЛАХОВСКОГО МЕТОД — количественное определение эфирносвязанного (эстерифицированного) холестерина в сыворотке крови. Предложен советским биохимиком С. Д. Балаховским в 1959 году.

Метод основан на проведении реакции Либерманна — Бурхардта (хлороформный экстракт холестерина в присутствии уксусного ангидрида и серной кислоты дает зеленое окрашивание, интенсивность которого определяется на фотоколориметре) после удаления из сыворотки крови свободного холестерина дигитонином и растворения в хлороформе эфирносвязанного холестерина.

Метод иногда применяется в клинической диагностике поражений печени, главным образом для оценки течения патологического процесса.

В норме содержание эстерифицированного холестерина в сыворотке крови составляет 90—135 мг%, свободного — 40—70 мг% или соответственно 70 и 30% от общего холестерина.

Техника определения. В пробирку вносят 0,1 мл сыворотки крови, 5 мл алкогольно-эфирной смеси (3 : 1), перемешивают поставляют стоять (не менее 1 часа). После этого центрифугируют 10—15 минут при 1500—2000 об/мин. Центрифугат количественно собирают и выпаривают на водяной бане (не полностью, оставляют 1,5—2 мл жидкости). Затем прибавляют 1 мл 1 % спиртового раствора дигитонина (дигитонин связывает свободный холестерин, образуя нерастворимое в хлороформе соединение) и оставляют на ночь, после чего раствор полностью выпаривают. Затем к осадку наливают 5 мл хлороформа и взбалтывают. Хлороформный экстракт количественно собирают, фильтруют и проводят цветную реакцию (добавляют 1 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают и ставят в темное место на 20 минут, после чего проводят колориметрирование).

Расчет производят по калибровочной кривой, составленной по стандартному раствору холестерина.

См. также Холестерин.


Библиогр. Балаховский С. Д. и Балаховский И. С. Методы химического анализа крови, М., 1953; Биохимические методы исследования в клинике, под ред. А. А. Покровского, с. 309, М., 1969; Старостенко Η. Т. Холестерин крови, Кишинев, 1961.

В. Я. Максимов.